T細胞來源Exosomes調(diào)節(jié)妊娠丟失孕鼠母胎界面趨化因子及粘附分子表達的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學位論文在導師( 或指導小組) 的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權(quán)對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表． 與學位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學所有。否則，承擔相應(yīng)的法律責任。研究生簽名：與弓扳導師簽章： ＼， I r ，＼∥ ，，馓諷℃Vl

2、二級學院領(lǐng)導蓋章：年 月 日河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名：揚孑圾導師簽章：氮批e ≥ 月 日中文摘要T 細胞來源E x o s o m e s 調(diào)節(jié)妊娠丟失孕鼠母胎界面趨化因子及粘附分子表達的研究摘 要目的：母胎界面免疫耐受異常是不明原因反復性

3、自然流產(chǎn)( U R S A ) 發(fā)生的重要機制。胚胎具有同種異體移植及自體移植的雙重特性，胎兒及其附屬物不被母體排斥并可在子宮內(nèi)發(fā)育成熟，需要母體必須形成母胎免疫耐受。一旦這種免疫耐受出現(xiàn)異常則可引發(fā)流產(chǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，母胎免疫耐受的建立和維持需由多種細胞和細胞因子介質(zhì)的參與和協(xié)同作用。因此，研究母．胎免疫耐受調(diào)節(jié)的確切機制，尋找能夠誘導母體對胎兒形成免疫耐受的治療方法，是開發(fā)防治U R S A 藥物、明確其免疫機理及指導臨床合理應(yīng)用的重要

4、研究方面。目前通過淋巴細胞免疫治療從而誘導母體對同種異體胚胎抗原形成免疫耐受在U R S A 的臨床防治中起到積極作甩。但是淋巴細胞穩(wěn)定性差，不易保存，需要新鮮制備，加之操作標準不一，臨床療效不穩(wěn)定，限制了臨床上的推廣。最近的研究發(fā)現(xiàn)，T 細胞在生長增殖過程中可分泌釋放一種稱為E x o s o m e s 的膜性微囊結(jié)構(gòu)。它恰恰克服了淋巴細胞免疫治療的局限性。本研究采用流產(chǎn)實驗動物模型，以分析T 細胞來源的E x o s o m e

5、s 調(diào)節(jié)母胎界面趨化因子( C X C R 4 ／S D F ．1 、C X C R 6 ) 以及粘附分子( C D 2 9 、C D l 0 6 )的表達，探討其誘導母胎免疫耐受的相關(guān)免疫學機制。方法：1 無關(guān)的雄性個體脾細胞及E x o s o m e s 的制備和初步鑒定：處死B A L B ／c 雄鼠，在無菌環(huán)境下解剖取脾，在獲得單個細胞懸液后，采用蔗糖密度梯度離心以及超濾技術(shù)獲得E x o s o m e s ；通過掃描、透射

6、電鏡觀察E x o s o m e s 的形態(tài)結(jié)構(gòu)，用紫外分光光度法測定其蛋白含量。2 建立流產(chǎn)動物模型及實驗分組：將雌雄小鼠按2 ：l 合籠交配；C B A ／J ( 早) ×B A L B ／c ( 8 ) 為正常妊娠對照動物模型( C o n t r o l 組) ，C B A ／J ( 早) x D B A ／2 ( 艿) 為流產(chǎn)動物模型。再將U R S A 孕鼠隨機分為3 組：1 ．妊娠丟失組( U R S A 組，