IL-11Rα靶向性近紅外熒光探針在骨肉瘤中的分子成像研究.pdf

1、背景:
　　影像學(xué)檢查是無(wú)創(chuàng)、早期發(fā)現(xiàn)腫瘤的重要途徑,而現(xiàn)有影像學(xué)檢查手段難以早期、特異性的對(duì)骨肉瘤做出診斷。分子成像可在細(xì)胞學(xué)或基因水平對(duì)疾病進(jìn)行成像診斷。近紅外光學(xué)成像是一種非損傷性體內(nèi)分子成像,其可以通過光學(xué)成像和靈敏的熒光顯微鏡獲知病理狀況及準(zhǔn)確的實(shí)時(shí)信息,從而為腫瘤早期診斷及靶向性治療提供影像學(xué)依據(jù)。IL-11Rα與骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān),是預(yù)后差的一個(gè)特征標(biāo)志。IL-11Rα具有與IL-11及其類似物高親和力結(jié)合的特性,

2、可作為骨肉瘤原發(fā)灶特異性顯像診斷及治療的靶點(diǎn)。
　　目的:
　　本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)骨肉瘤中IL-11Rα的表達(dá)進(jìn)行非損傷性評(píng)價(jià),探討靶向IL-11Rα的IL-11造影劑在異種種植骨肉瘤模型中成像的特異性,為骨肉瘤的診治提供一種新的途徑和方法。
　　方法:
　　1.通過免疫組化染色檢測(cè)人骨肉瘤組織標(biāo)本中IL-11Rα的表達(dá)水平。通過流式細(xì)胞術(shù)及Western-Blot方法檢測(cè)骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞系中IL-11Rα

3、的表達(dá)水平。
　　2.通過共聚焦顯微鏡觀察IL-11造影劑(環(huán)九肽和近紅外染料NIR-783偶聯(lián))與骨肉瘤細(xì)胞系SOSP-9607的體外結(jié)合特性。建立其荷瘤裸鼠模型,經(jīng)尾靜脈注射IL-11造影劑(5nmol/0.1m1)后,進(jìn)行多模式活體成像,在不同時(shí)間點(diǎn)連續(xù)采集圖像,檢測(cè)造影劑在腫瘤組織中的攝取情況及其藥代動(dòng)力學(xué)變化情況。
　　3.對(duì)離體腫瘤及臟器進(jìn)行熒光成像并進(jìn)行病理切片,免疫組織化學(xué)以及HE染色證實(shí)離體成像與體內(nèi)成像結(jié)

4、果的一致性。計(jì)算靶點(diǎn)背景比及背景噪聲比,探討腫瘤靶向性顯影的最佳時(shí)間段。
　　結(jié)果:
　　1.免疫組織化學(xué)染色證實(shí)89.5％的人骨肉瘤組織中IL-11Rα表達(dá)陽(yáng)性,Western-blot實(shí)驗(yàn)證實(shí)骨肉瘤細(xì)胞系SOSP-9607中IL-11Rα呈陽(yáng)性表達(dá),流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)其陽(yáng)性表達(dá)百分比為62.9%。
　　2.合成IL-11模擬物環(huán)九肽,使其與近紅外染料偶聯(lián)(NIR-783),研制了IL-11造影劑。體外細(xì)胞結(jié)合試驗(yàn)表明,

5、IL-11造影劑能與IL-11Rα陽(yáng)性的人骨肉瘤細(xì)胞系SOSP-9607細(xì)胞特異性結(jié)合。體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明,通過近紅外熒光成像的方法,利用IL-11造影劑,能夠?qū)θ斯侨饬龊闪雎闶竽Ｐ瓦M(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、特異性的靶向性顯影。
　　3.造影劑進(jìn)入體內(nèi)后迅速于全身顯影,在血液和非靶向組織中快速清除,通過肝臟和腎臟同時(shí)代謝,藥代動(dòng)力學(xué)良好,其動(dòng)態(tài)顯示效果表明,注射造影劑8h時(shí)圖像信噪比高,本底低,適于靶向性顯像。免疫組織化學(xué)及HE染色證實(shí)高信號(hào)

6、組織來(lái)源于腫瘤。
　　結(jié)論:
　　1.IL-11Rα可作為骨肉瘤特異性成像的靶點(diǎn);
　　2.IL-11造影劑可與IL-11Rα陽(yáng)性的骨肉瘤SOSP-9607細(xì)胞特異性結(jié)合;通過近紅外熒光成像的方法,利用IL-11造影劑,能夠?qū)θ斯侨饬龊闪雎闶竽Ｐ桶邢蛐燥@影,其動(dòng)態(tài)顯示效果表明注射造影劑8h時(shí)圖像適于靶向性顯影;
　　3.IL-11近紅外熒光造影劑藥代動(dòng)力學(xué)良好,有望為IL-11Rα表達(dá)陽(yáng)性的骨肉瘤提供新的分子顯像