實時熒光定量PCR檢測骨肉瘤病人血清中microRNA的表達.pdf

1、目的：探索骨肉瘤病人血清中相關miRNA的表達水平，為進一步研究miRNA與骨肉瘤的診斷和治療做基礎。
　　 方法：應用莖-環(huán)狀反轉錄引物實時熒光定量PCR（stemloop RT-Qpcr，TaqMan探針法）檢測骨肉瘤病人血清中相關miRNA的表達水平，其中骨肉瘤病人未化療組血清10例，骨肉瘤病人化療組血清10例和健康人血清10例。以U6snRNA為內(nèi)參，檢測miR29c，miR-132，miR-199a-3p，miR-22

2、1在血清中的表達水平。分析骨肉瘤臨床病理特征與miRNA表達水平之間的關系。所有資料輸入SPSS17.0統(tǒng)計軟件中處理，以α＝0.05作為檢驗標準。
　　 結果：⑴4種miRNA在所有血清標本中都能檢測到。⑵與健康人比較，miR-29c，miR-221在骨肉瘤病人血清中的表達水平上調(diào)，P＜0.05;miR-199a-3p和miR-132沒有明顯差別，P＞0.05。⑶4種miRNA在骨肉瘤病人血清中的表達水平與病理分級、病理分型、

3、Enneking外科分期、ALP無關，P＞0.05。⑷4種miRNA在骨肉瘤病人血清中的表達水平未化療組與化療組之間無明顯差異，P＞0.05。
　　 結論：①人血清中存在miRNA并且可以方便的應用實時熒光定量PCR進行檢測；stem-loop RT-qPCR（TaqMan探針法）檢測法是靈敏的，特異的，方便的定量檢測miRNA的方法。②miR-29c和miR-221在骨肉瘤病人血清中的表達水平上調(diào)，可作為骨肉瘤的候選血清學生物