馬鈴薯花藥培養(yǎng)影響因素的研究.pdf

1、本試驗對34個不同的馬鈴薯品種(系)進行花藥培養(yǎng)，研究馬鈴薯基因型、激素種類、花粉發(fā)育時期、以及培養(yǎng)基附加物硝酸銀、活性炭、馬鈴薯提取液等因素對馬鈴薯花藥愈傷組織誘導率及褐化率的影響；同時對馬鈴薯花藥培養(yǎng)獲得的再生植株進行細胞學鑒定；并對獲得的雙單倍體進行了農(nóng)藝性狀鑒定。試驗結(jié)果如下： 1.小孢子處于單核靠邊期時，花蕾大小6.0～7.5mm左右，顏色為淺綠色，此時適于馬鈴薯花藥培養(yǎng)。 2.馬鈴薯花藥培養(yǎng)對基因型有很大的依

2、賴性?？诵?3的愈傷組織的誘導率高是7.4％，大地三號和尤金的愈傷組織的誘導率為0。 3.低溫預處理和熱激處理均能明顯地提高馬鈴薯愈傷組織的誘導率，克新16在4℃條件下處理4d效果好，誘導率可達13.18％。接種后的馬鈴薯花藥在32℃熱激處理，處理時間為48h效果好，訥16誘導率達14.93％。當熱激與低溫處理配合使用效果好，克13誘導率可達14.93％。 4.甘露醇預處理訥16和克新13，隨著處理的天數(shù)增加，愈傷誘導率

3、均呈現(xiàn)了先升后降的趨勢，不同的材料，達到誘導率最高值的預處理天數(shù)基本相同。預處理時間為4d愈傷組織誘導率達到最大值。甘露醇濃度40g/L效果好。 5.激素對花藥培養(yǎng)起關鍵性的作用。MS+NAA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L+KT1.0mg/L適合愈傷組織的誘導。 6.蔗糖濃度為6％B寸，馬鈴薯愈傷組織的誘導率高。馬鈴薯提取液能夠促進愈傷組織的發(fā)生，濃度為50g/L效果較好。當蔗糖和麥芽糖濃度都為6％時，麥芽糖對

4、愈傷組織的誘導率要好于蔗糖。 7.適量添加硝酸銀和活性炭可以減輕一些作物花藥培養(yǎng)時的褐化程度，培養(yǎng)基中加入20mg/L硝酸銀效果最佳，活性炭的濃度1.5g/L效果最佳。 8.利用氣孔保衛(wèi)細胞葉綠體計數(shù)法可鑒定植株染色體倍性。本試驗結(jié)果表明：克新16雙單倍體氣孔保衛(wèi)細胞葉綠體數(shù)在10～20個范圍內(nèi)，四倍體在20～30個范圍內(nèi)，葉綠體數(shù)少于20個的為雙單倍體，多于20個而少于30個的為四倍體。 9.移栽的雙單倍體植株