SOD活性的毛細(xì)管電泳測(cè)定及與酸棗仁皂苷的抗氧化協(xié)同作用.pdf

1、酸棗仁作為食藥同源的傳統(tǒng)天然產(chǎn)物,在我國(guó)具有悠久的使用歷史。對(duì)酸棗仁作用的大量研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)及機(jī)體免疫功能等都具有廣泛的影響,能有效發(fā)揮鎮(zhèn)靜催眠、保護(hù)心肌細(xì)胞、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗腫瘤等多種功效,在臨床上具有廣闊的應(yīng)用前景。而酸棗仁中最主要的有效成分是酸棗仁皂苷A和B。對(duì)酸棗仁皂苷進(jìn)行提取分離對(duì)于更有效地開(kāi)發(fā)利用此資源具有重要意義。超氧化物歧化酶(SOD)是體內(nèi)的一種可以消除超氧陰離子自由基的抗氧化酶,具有抗氧化,抗

2、衰老,抗輻射,提高機(jī)體免疫力,減輕腫瘤患者在放療、化療過(guò)程中的嚴(yán)重毒副作用等生理功能。建立SOD活性測(cè)定新方法,在此基礎(chǔ)上研究酸棗仁皂苷與SOD抗氧化協(xié)同作用,將為SOD的研究應(yīng)用及闡明酸棗仁的藥理作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。基于以上目的,本論文主要做了以下幾方面的研究:
　　 1、建立了超聲回流法提取酸棗仁皂苷的新工藝,通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)詳細(xì)考察了提取方法的影響因素,確定酸棗仁皂苷的最佳提取工藝為:在超聲功率為1kW

3、條件下,超聲時(shí)間140min、乙醇體積分?jǐn)?shù)75%、料液比1:12。在此條件下脫脂酸棗仁中酸棗仁皂苷平均得率為0.77‰,RSD=0.61%。與索氏法和超聲法相比,皂苷得率有較大提高。
　　 2、建立了SOD活性的毛細(xì)管區(qū)帶電泳檢測(cè)新方法。在優(yōu)化的電泳條件下,得到SOD在0.1～0.5mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,IC50=0.27mg/L,精密度為1.97%;血清樣品在20-100μL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,血清的IC50=76.4μ

4、L,活性為26.18U/mL,加標(biāo)回收率為97.6%～99.2%。
　　 3、首次建立了通過(guò)評(píng)價(jià)酸棗仁皂苷與SOD獨(dú)立抗氧化作用之和與共同抗氧化作用的差異判斷其是否具有抗氧化協(xié)同作用的新方法。利用建立的SOD活性的測(cè)定方法,在血清介質(zhì)存在條件下,測(cè)定了酸棗仁皂苷體外清除自由基的活性,評(píng)價(jià)了酸棗仁皂苷與SOD的抗氧化協(xié)同作用。試驗(yàn)結(jié)果表明酸棗仁皂苷A和B均具有一定的清除O2的活性,且均與SOD具有抗氧化協(xié)同作用。酸棗仁皂苷A和B與