醛糖還原酶調(diào)控miR-200a-miR-141以影響TGFβ信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和糖尿病小鼠腎皮質(zhì)纖維化病變.pdf

1、醛糖還原酶(aldose reductase,AR)是多元醇糖代謝支路的限速酶。已有很多研究證實(shí)AR在糖尿病并發(fā)癥如糖尿病神經(jīng)病、糖尿病視網(wǎng)膜病中起到重要的作用。我們前期的工作表明,AR的遺傳缺失抑制了高糖引起的PKC/TGFβ的激活,進(jìn)而顯著減緩了C57BL/6小鼠糖尿病腎病的進(jìn)程(Liu et al.,Diabetologia,2011)。然而,AR是如何調(diào)控TGFβ和腎細(xì)胞纖維化卻不清楚。本研究因而在腎細(xì)胞和組織中探討了AR對mi

2、R-200a/miR-141等表達(dá)的影響,以及miR-200a/miR-141對TGFβ等的調(diào)控和對小鼠糖尿病腎病病變的影響。
　　 我們在SV40 MES13小鼠腎小球系膜細(xì)胞中過表達(dá)或抑制AR,分析AR活性變化對miR-200a/miR-141和一些促纖維化基因表達(dá)的影響及miRNAs對靶基因的調(diào)控作用。通過對雄性8周齡C57BL/6小鼠野生型(WT)、AR基因敲除型(KO)和AR雙轉(zhuǎn)基因型小鼠(BT)腹腔注射40 mg/k

3、g體重鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)糖尿病。糖尿病維持17周后,分析比較AR正常小鼠和AR缺失小鼠腎皮質(zhì)中miR-200a和miR-141的表達(dá)及腎皮質(zhì)中TGFβ2和纖維粘連蛋白Fibronectin等的蛋白表達(dá)。
　　 在SV40 MES13小鼠腎小球系膜細(xì)胞中過量表達(dá)AR后,miR-200a/miR-141的表達(dá)受到顯著的抑制。與此同時(shí),Tgfβ2和Fibronectin等mRNA表達(dá)顯著升高。而在該株細(xì)胞中過量表達(dá)miR-200

4、a/miR-141則顯著抑制Tgfβ1/2、Fibronectin等促纖維化基因的表達(dá)。熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)分析表明,miR-200a/miR-141對Tgfβ2和Fibronectin的抑制是通過與mRNA3’端非編碼區(qū)的相互作用而實(shí)現(xiàn)的。在STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠中,AR缺失的小鼠腎皮質(zhì)中miR-200a/miR-141的表達(dá)比AR正常的小鼠顯著升高:同時(shí),腎皮質(zhì)中TGFβ2和Fibronectin的蛋白表達(dá)在糖尿病KO小鼠和糖尿病B