高效液相色譜-熒光檢測法研究阿德福韋前藥藥代動力學及組織分布.pdf

1、阿德福韋酯(adefovir dipivoxil,ADV)是新一代核苷類抗病毒藥物,ADV在體內迅速代謝為活性物質阿德福韋(adefovir,PMEA),為PMEA的前體藥物。體內外試驗表明阿德福韋不僅對野生乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)有效,對拉米夫定耐藥的HBV病毒株也有顯著的抑制作用,現(xiàn)已廣泛應用于慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的抗病毒治療。然而,動物和人體試驗研究表明口服A

2、DV具有潛在的劑量依賴腎臟毒性,其毒性作用和嚴重程度與劑量及用藥時間呈正相關,一定程度上限制了其臨床應用,因此,尋求新的ADV替代藥物成為必要。
　　 M1和M2是一類新合成的阿德福韋前體藥物,其結構與ADV類似,為考察二者的早期藥代動力學及組織分布,本研究選用beagle犬和wister大鼠為研究對象,以ADV作為參比藥物,比較M1和M2與ADV的相對生物利用度。由于M1,M2在體內迅速代謝為活性物質PMEA,因此只需要通過測

3、定PMEA的濃度,即可反映M1和M2在動物體內的血藥濃度和組織分布變化情況。
　　 本論文分別建立了高效液相色譜.熒光檢測法測定了PMEA在beagle犬血漿及wister大鼠組織中的分布情況,并進行了系統(tǒng)的方法學考察。通過動物實驗篩選并比較阿德福韋酯類前藥M1和M2與ADV在beagle犬血漿及wister大鼠組織中的PMEA分布情況,為抗HBV新藥的進一步開發(fā)提供一定的理論基礎。
　　 第一部分:建立PMEA在bea

4、gle犬血漿中的HPLC-熒光測定方法。研究ADV與M1,M2在beagle犬體內的藥代動力學,比較M1,M2與ADV的相對生物利用度。以PMEA為測定藥物,替諾福韋(tenofovir,PMPA)為內標,PMEA經(jīng)柱前衍生化使之與氯乙醛反應生成高熒光物質1,N6-乙烯基腺嘌呤衍生物,建立了HPLC-熒光檢測的測定方法,并進行了系統(tǒng)的方法學驗證。藥代動力學研究表明:灌服給藥后的平均血漿藥物濃度為ADV>M1>M2,相對生物利用度比較結果

5、:以ADV的AUC值為標準計算后二者相對生物利用度F分別為56.79％,42.90％。
　　 第二部分:建立PMEA在wister大鼠組織中HPLC-熒光測定方法。研究ADV與M1,M2在wister大鼠組織肝、腎內分布情況。以PMEA為測定藥物,PMPA為內標,PMEA經(jīng)柱前衍生化使之與氯乙醛反應生成高熒光物質1,N6-乙烯基腺嘌呤衍生物,建立了HPLC-熒光檢測的測定方法,并進行了系統(tǒng)的方法學驗證。組織分布研究表明:肝中M2