吲哚美辛對(duì)COPD模型大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2及Bax表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)制備慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型，用吲哚美辛對(duì)COPD模型大鼠進(jìn)行干預(yù)，觀察膈肌、趾長(zhǎng)伸肌的Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)及其骨骼肌細(xì)胞的凋亡率，探討吲哚美辛對(duì)COPD模型大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2及Bax表達(dá)的影響。 方法：100只健康Wistar大鼠隨機(jī)分為模型組80只，正常對(duì)照組20只。模型組采用1～14天，16～60天熏香煙，第15天氣管內(nèi)注入豬胰蛋白酶（PEE）的方法建立COPD大鼠模型。正常對(duì)

2、照組不熏香煙，在模型組氣管內(nèi)注入PEE的同一天采用相同術(shù)式氣管內(nèi)注入等量生理鹽水。繼續(xù)飼養(yǎng)8天，以低于正常對(duì)照組大鼠平均體重的90％作為判斷發(fā)生營(yíng)養(yǎng)不良的標(biāo)準(zhǔn)，將模型組大鼠分為：COPD營(yíng)養(yǎng)正常組和COPD營(yíng)養(yǎng)不良組。COPD營(yíng)養(yǎng)不良組按隨機(jī)化原則分為COPD營(yíng)養(yǎng)不良生理鹽水組、吲哚美辛1組、吲哚美辛2組、吲哚美辛3組，總計(jì)6個(gè)小組。正常對(duì)照組、COPD營(yíng)養(yǎng)正常組和COPD營(yíng)養(yǎng)不良生理鹽水組灌胃生理鹽水，吲哚美辛1組給予吲哚美辛0.5m

3、g/kg、吲哚美辛2組給予吲哚美辛1.0mg/kg、吲哚美辛3組給予吲哚美辛2.0mg/kg進(jìn)行灌胃干預(yù)，共給藥14天，繼續(xù)飼養(yǎng)14天后取大鼠膈肌、趾長(zhǎng)伸肌制備石蠟切片，分別采用TUNEL法測(cè)定膈肌、趾長(zhǎng)伸肌石蠟切片細(xì)胞凋亡率和免疫組織化學(xué)法測(cè)定Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)，ImageJ圖像系統(tǒng)測(cè)定免疫組化蛋白表達(dá)強(qiáng)度，所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0軟件進(jìn)行完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的方差分析、t檢驗(yàn)及直線相關(guān)性分析。 結(jié)果：1.吲哚美辛2組膈肌細(xì)

4、胞、趾長(zhǎng)伸肌細(xì)胞凋亡率低于COPD營(yíng)養(yǎng)不良生理鹽水組、吲哚美辛1組、吲哚美辛3組（P<0.05），高于正常對(duì)照組和COPD營(yíng)養(yǎng)正常組大鼠（P<0.05）。同組內(nèi)比較膈肌細(xì)胞凋亡率高于趾長(zhǎng)伸肌細(xì)胞凋亡率，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 2.吲哚美辛2組膈肌和趾長(zhǎng)伸肌Bcl-2蛋白表達(dá)高于COPD營(yíng)養(yǎng)不良生理鹽水組、吲哚美辛1組、吲哚美辛3組（P<0.05）。同組內(nèi)比較膈肌和趾長(zhǎng)伸肌Bcl-2蛋白表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）。

5、 3.吲哚美辛2組膈肌、趾長(zhǎng)伸肌Bax的蛋白表達(dá)均弱于吲哚美辛1組（P<0.05）、吲哚美辛3組（P<0.05）。同組內(nèi)比較大鼠膈肌和趾長(zhǎng)伸肌Bax的蛋白表達(dá)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論： 1.細(xì)胞凋亡可能是COPD模型大鼠骨骼肌萎縮的重要機(jī)制。Bcl-2、Bax參與調(diào)節(jié)COPD模型大鼠骨骼肌凋亡。 2.不同劑量的吲哚美辛對(duì)COPD營(yíng)養(yǎng)不良模型大鼠干預(yù)，結(jié)果提示吲哚美辛1.0mg/kg劑量可改善