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1、目的:觀察早期注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)對(duì)制動(dòng)大鼠骨骼肌細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響。
方法:取幼齡大鼠(80-100g)脛骨和股骨,分離培養(yǎng)大鼠BMSCs。用可塑性石膏制備右下肢管型固定肌萎縮模型,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字分組法將24只大鼠分成假手術(shù)組,干細(xì)胞組,PBS組,干細(xì)胞組大鼠下肢制動(dòng)48h后比目魚肌局部多點(diǎn)注射1×106個(gè)BMSCs;PBS組大鼠下肢制動(dòng)4
2、8h后注射等量磷酸緩沖液(phosphate-buffered saline,PBS);假手術(shù)組大鼠下肢包裹相同重量石膏且不限制關(guān)節(jié)活動(dòng),48h后注射等量PBS,14天后各組大鼠拆除石膏取標(biāo)本分析。
結(jié)果:培養(yǎng)中的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)以梭形細(xì)胞為主,呈放射狀排列的細(xì)胞集落,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,可連續(xù)穩(wěn)定傳代10代以上。實(shí)驗(yàn)中第4代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志CD44,CD90均呈陽性表達(dá),陽性率分別為95.84%,96.00%,而C
3、D34,CD45陽性率極低,其陽性表達(dá)率分別為3.81%,4.25%。Western blot結(jié)果:與假手術(shù)組大鼠比目魚肌中Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)量[(0.14±0.11);(0.81±0.06)]比較,干細(xì)胞組和PBS組Bax蛋白表達(dá)量[(0.41±0.08);(0.63±0.10)]明顯升高,而兩組Bcl-2蛋白表達(dá)量[(0.47±0.14);(0.22±0.13)]明顯降低;干細(xì)胞組中Bax蛋白的表達(dá)較PBS組降低明顯,而Bc
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