基質(zhì)金屬蛋白酶-10基因多態(tài)性與頸動(dòng)脈斑塊易損性的關(guān)系.pdf

1、研究背景:目前腦血管病已成為我國城市和農(nóng)村人口的第一位致殘和死亡原因，且發(fā)病有逐年增多的趨勢，其中約70％為缺血性腦卒中。在缺血性腦卒中諸多危險(xiǎn)因素中，頸動(dòng)脈粥樣硬化與其發(fā)生、復(fù)發(fā)之間的密切關(guān)系已為眾多學(xué)者所公認(rèn)。相比在血管的最狹窄處發(fā)生卒中，更常見的機(jī)制是頸動(dòng)脈易損斑塊不可預(yù)測地突然破損，包括破裂、裂隙或潰瘍形成、血小板激活、血栓形成，進(jìn)而脫落阻塞遠(yuǎn)端血管。
　　 基質(zhì)金屬蛋白酶-10（MMP-10）在體外可降解許多細(xì)胞外基質(zhì)

2、（ECM）成分，可以激活MMP-1原、MMP-7原、MMP-8原、MMP-9原，并和其他MMPs一起在不同的病理?xiàng)l件下降解ECM，而后者的含量與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性密切相關(guān)。研究表明，MMP-10存在于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，其血清水平與炎癥指標(biāo)、頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度(IMT)、動(dòng)脈粥樣斑塊形成關(guān)系密切。
　　 蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和功能從根本上是由氨基酸序列決定的，位于MMP-10外顯子區(qū)的非同義單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點(diǎn)由于各個(gè)不同

3、基因型翻譯產(chǎn)物存在氨基酸序列的差別，可能導(dǎo)致MMP-10活性或功能的差別，并最終影響頸動(dòng)脈斑塊的穩(wěn)定性。但目前尚無關(guān)于MMP-10基因多態(tài)性與頸動(dòng)脈斑塊易損性的關(guān)系的研究。因?yàn)槎鄳B(tài)性位點(diǎn)rs17435959（g.102651313G/C，p.Leu4Val），其在蛋白水平上表現(xiàn)為第4位氨基酸由亮氨酸(Leu)突變?yōu)槔i氨酸(Val);位點(diǎn)rs17293607(g.102650389C/T，p.Gly65Arg)在蛋白水平上表現(xiàn)為第65位氨

4、基酸由甘氨酸(Gly)突變?yōu)榫彼幔ˋrg），本研究就這兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與頸動(dòng)脈斑塊易損性的關(guān)系進(jìn)行探討。
　　 目的:探討MMP-10基因兩個(gè)外顯子區(qū)SNP與頸動(dòng)脈斑塊易損性的關(guān)系。
　　 方法:病例納入標(biāo)準(zhǔn):連續(xù)收集2010年1月至2012年4月的該院住院患者，由超聲診斷科從事血管超聲的兩名高年資醫(yī)師獨(dú)立進(jìn)行頸動(dòng)脈超聲檢查，將結(jié)果一致的有低回聲或混合回聲斑塊的患者納入易損斑塊組（n=206），只有高回聲斑塊或只有內(nèi)膜增

5、厚≥1.0mm而未見斑塊的患者納入非易損斑塊組(n=379)。
　　 病例排除標(biāo)準(zhǔn):3月內(nèi)腦出血、3月內(nèi)顱內(nèi)感染、3月內(nèi)急性心肌梗死、心房顫動(dòng)、心臟瓣膜病、動(dòng)脈瘤、嚴(yán)重肝腎功能不全、血液病、自身免疫性疾病、風(fēng)濕性疾病、慢性炎癥性疾病以及結(jié)核、惡性腫瘤、妊娠者。
　　 抽取入組者入院第2天的清晨空腹肘靜脈血，并采用試劑盒法提取白細(xì)胞基因組DNA。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR) TaqMan法分析MMP-10基

6、因兩個(gè)位點(diǎn)(rs17435959、rs17293607)的多態(tài)性。采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、研究對(duì)象：一般臨床資料比較表明頸動(dòng)脈易損斑塊組與非易損斑塊組之間在年齡、性別、體重指數(shù)、吸煙史、血壓、血糖、血脂等臨床一般資料方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、頸動(dòng)脈易損斑塊組與非易損斑塊組的rs17435959(G/C)位點(diǎn)的基因型分布符合Hardy-

7、Weinberg平衡(P=0.089、1.000)。C等位基因頻率在4.3％～9.7％之間。易損斑塊組、非易損斑塊組的GC+CC基因型頻率分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，校正危險(xiǎn)因素后，其仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其C等位基因頻率分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，校正危險(xiǎn)因素后，其仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002，OR=2.104)。在分層分析時(shí)，男性亞組的易損斑塊患者的GC+CC基因型頻率(x2=4.04，P=0.044，OR=1.919)及C等位基因頻率(x2=5.

8、30，P=0.021，OR=2.017)均高于非易損斑塊患者;在女性亞組的易損斑塊患者的C等位基因頻率(x2=5.38，P=0.020，OR=2.390)也高于非易損斑塊患者，GC+CC基因型頻率(x2=3.54，P=0.060，OR=2.147)的差異尚無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;經(jīng)logistic回歸校正后上述差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3在449例研究對(duì)象中（易損斑塊組143例、非易損斑塊組306例）共發(fā)現(xiàn)5例rs17293607(C/

9、T)位點(diǎn)的雜合子，其中4例存在非易損斑塊，1例存在易損斑塊，未發(fā)現(xiàn)TT基因型?；蛐头植挤螲ardy-Weinberg平衡(P=1.000、1.000)。但T等位基因的頻率很小，各組頻率為易損斑塊組1/286(0.34％)，非易損斑塊組4/612(0.65％)，總的人群分布頻率為5/898(0.56％)。
　　 結(jié)論：MMP-10基因rs17435959位點(diǎn)多態(tài)性可能與中國漢族人群頸動(dòng)脈易損斑塊的發(fā)生有關(guān)，該位點(diǎn)C等位基因可能