氯氮平對(duì)雄性C57BL-6小鼠糖、脂代謝及其骨骼肌PPAR-γ mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、一、目的： 研究不同劑量氯氮平對(duì)雄性C57BL/6小鼠體重、血糖、葡萄糖耐量、血脂及胰島素水平的影響，然后采用分子生物學(xué)的方法從基因水平深入研究氯氮平對(duì)小鼠骨骼肌過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-r(PPAR-r)mRNA表達(dá)的影響，旨在探明氯氮平致糖、脂代謝異常的可能藥理作用機(jī)制。 二、方法： 1．動(dòng)物分組與模型制作根據(jù)實(shí)驗(yàn)前小鼠體重和空腹血糖值，將60只雄性C57BL/6小鼠進(jìn)行隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，分為空白對(duì)照組、2.0

2、 mg·kg-1氯氮平組和10.0mg·kg-1氯氮平組共計(jì)3組，每組20只，按每籠10只喂養(yǎng)。各組小鼠每日腹腔注射空白溶媒或氯氮平注射液1次，連續(xù)注射28 d。 2．測(cè)定指標(biāo)和生物樣本的采集于給藥前(0d)、給藥后第7、14、21、28 d分別測(cè)定各組小鼠體重；連續(xù)腹腔注射給藥28 d后禁食過(guò)夜，于試驗(yàn)的第29 d早晨測(cè)定空腹血糖并進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)，隨后再禁食6 h，用戊巴比妥鈉(130 mg·kg-1)麻醉小鼠，摘除小鼠眼

3、球取血，分離血漿，-20℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆糜跍y(cè)定小鼠血脂(TG、TC、HDL-C和LDL-C)、胰島素含量及計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)；同時(shí)迅速提取出小鼠股四頭肌置凍存管中，立即投入液氮中冷凍，后放入-70℃冰箱保存待測(cè)。 3．生物樣本的測(cè)定方法血糖用強(qiáng)生穩(wěn)豪血糖儀測(cè)定；血脂(TG、TC、HDL-C和LDL-C)采用7600-020 HITACHI自動(dòng)生化儀測(cè)定；血漿胰島素含量測(cè)定采用體外放射免疫試劑盒。 小鼠骨骼肌中PPAR-

4、γ mRNA表達(dá)水平的測(cè)定采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)的方法檢測(cè)。 三、結(jié)果： 1．氯氮平對(duì)小鼠體重的影響在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間空白對(duì)照組小鼠體重逐漸增加；與空白對(duì)照組相比，在給藥后第14、21及28 d，2.0 mg·kg-1氯氮平組小鼠體重減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；10.0 mg·kg-1氯氮平組小鼠體重下降明顯(P<0.05)。 2．氯氮平對(duì)小鼠空腹血糖、葡萄糖耐量、血脂及胰島素的影響腹腔注射氯氮平28

5、 d后，與空白對(duì)照組相比，2.0 mg·kg-1氯氮平組空腹血糖、胰島素水平及胰島素抵抗指數(shù)升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其葡萄糖耐量及血脂(TG、TC、HDL-C和LDL-C)幾乎無(wú)變化。10.0mg·kg-1氯氮平組空腹血糖、血糖曲線(xiàn)下面積(AUC(BG))、胰島素水平及胰島素抵抗指數(shù)顯著增加(p<0.05)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)明顯下降(p<0.05)，但其TG、TC和LDL-C幾乎無(wú)變化。 3.氯氮平對(duì)小鼠骨骼肌

6、PPAR-γ mRNA表達(dá)量的影響各組小鼠骨骼肌均有PPAR-γmRNA的表達(dá)；與空白對(duì)照組相比，腹腔注射氯氮平28d后，氯氮平各劑量組(2.0mg.kg·-1、10.0mg·kg-1)小鼠骨骼肌PPAR-γ mRNA表達(dá)量均有減少，但各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05)。 四、結(jié)論： 1.長(zhǎng)期腹腔注射給予氯氮平(10.0 mg·kg-1)可使雄性C57BL/6小鼠血糖、胰島素水平升高，體重、HDL-C降低以及誘發(fā)胰島