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文檔簡介
1、①探討Geneticin及其相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法在離體純化培養(yǎng)NF1患者神經(jīng)纖維瘤雪旺細(xì)胞中的作用,獲得純凈的雪旺細(xì)胞;②通過對NF1蛋白和hTERT蛋白表達(dá)水平的研究,探討NF1患者神經(jīng)纖維瘤發(fā)生、發(fā)展的分子病理機(jī)制;③通過E2和其受體拮抗劑對離體腫瘤細(xì)胞的干預(yù),探討E<,2>和E<,2>受體拮抗劑對神經(jīng)纖維瘤的形成和發(fā)展的影響,分析其可能的細(xì)胞分子機(jī)制.結(jié)論:5.1 NF1患者神經(jīng)纖維瘤中雪旺細(xì)胞純化培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究5.1.1應(yīng)用含有Gene
2、ticin的培養(yǎng)液培養(yǎng)NF1神經(jīng)纖維瘤細(xì)胞,結(jié)合酶快速消化法和差數(shù)貼壁法,能夠有效地去除成纖維細(xì)胞的沾染,獲得純度高、活力良好的雪旺細(xì)胞.5.1.2應(yīng)用含有100ug/ml的Geneticin的培養(yǎng)液培養(yǎng)NF1神經(jīng)纖維瘤細(xì)胞2~3天,既能有效地去除成纖維細(xì)胞,又不會影響雪旺細(xì)胞活力.5.2 NF1中神經(jīng)纖維瘤發(fā)生機(jī)制及雌激素調(diào)控作用的研究5.2.1 NF1患者神經(jīng)纖維瘤的形成除了與NF1蛋白表達(dá)缺失,腫瘤抑制作用減弱有關(guān)外還與hTERT
3、蛋白表達(dá)增加,端粒酶活性增高有關(guān);而非NF1患者神經(jīng)纖維瘤的形成與hTERT蛋白表達(dá)增加,端粒酶活性增高有關(guān),與NF1蛋白表達(dá)缺失無關(guān).5.2.2 E<,2>能夠促進(jìn)NF1神經(jīng)纖維瘤中雪旺細(xì)胞的增殖,其中生理濃度10-7mol/L的E<,2>作用24小時能明顯增加雪旺細(xì)胞的增殖能力.5.2.3 E<,2>對NF1中神經(jīng)纖維瘤形成的促進(jìn)作用是通過提高h(yuǎn)TERT蛋白表達(dá),進(jìn)而增加端粒酶活性促進(jìn)細(xì)胞增殖這一通路,而非上調(diào)NF1蛋白表達(dá).E<,
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