病理性瘢痕的射頻消融治療及基于基因表達譜的藥物篩選實驗研究.pdf

1、目的：
　　評估射頻消融治療病理性瘢痕的臨床療效,為進一步解決消融術后瘢痕復發(fā)的問題，進行了藥物篩選的實驗研究。采用表達譜芯片對病理性瘢痕組織和正常人皮膚組織進行檢測，篩選病理性瘢痕組織的差異表達基因。運用生物信息學手段，依據(jù)差異基因表達譜數(shù)據(jù)，篩選治療病理性瘢痕的藥物。在兔耳瘢痕模型上，對篩選出的藥物進行驗證。
　　方法：
　　1）使用皮膚射頻治療儀在病理性瘢痕組織上進行射頻消融，術后采用溫哥華瘢痕量表，對療效進行評

2、估。2）應用基因表達譜芯片篩選病理性瘢痕組織與正常人皮膚組織的差異表達基因。對差異表達基因數(shù)據(jù)進行Go和Pathway分析，闡釋瘢痕發(fā)生機制。3）將差異表達基因數(shù)據(jù)，輸入在線的Cmap數(shù)據(jù)庫中，運用生物信息學手段，篩選可以用于治療病理性瘢痕的化合物或藥物。4）將篩選出的藥物紫衫醇，按不同濃度配制藥液，以注射的方式作用于兔兒瘢痕動物模型上，觀察藥物對兔耳增生瘢痕的組織形態(tài)學作用，尋找最佳的用藥濃度范圍。
　　結果：
　　1）患

3、者采用射頻消融治療病理性瘢痕后，瘢痕的顏色、厚度、柔軟度都得到了顯著改善。2）病理性瘢痕組織與正常人皮皮膚組織相比，差異表達2倍以上基因5001個；差異表達5倍以上基因956；差異表達20倍以上基因144個。3）表達上調基因的相關通路有：細胞外基質受體反應，黏著斑，O-GalNAc聚糖的生物合成，TGF-β信號通路，細胞因子及其受體的相互作用，糖胺聚糖，Toll樣受體信號通路，細胞粘附分子，腫瘤相關信號通路，肌動蛋白細胞骨架體系等。表達

4、下調基因的相關通路有：細胞色素P450酶，花生四烯酸代謝，性激素代謝，維生素A代謝，類固醇合成，脂類代謝，氨基酸降解等。4）在分子功能方面，上調的差異性表達基因，主要與蛋白的結合，金屬離子的結合，細胞外基質的構成，肽酶的活性，整合蛋白結合，轉錄因子活性等相關。下調的差異性表達基因，主要與酶的活性、離子的結合與運動、離子通路的活性相關。5）從生物學過程來看，上調的差異性表達基因，主要與細胞粘附，膠原纖維構成，膠原蛋白分解，細胞分化，細胞信

5、號轉導，細胞缺氧反應，細胞基質粘附，整聯(lián)蛋白介導的信號通路，神經骨骼發(fā)育等相關。下調的差異性表達基因，主要與細胞氧化還原反應，細胞分化，脂類的代謝與合成以及炎性反應相關。6）從Cmap數(shù)據(jù)庫中，篩選出16個負性富集分數(shù)較高的藥物。7）藥物紫衫醇對兔兒增生性瘢痕的成纖維細胞增殖、膠原沉積、微血管增生均有抑制作用。在一定濃度范圍內，兔耳瘢痕增生程度隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負相關。
　　結論：
　　1）射頻消融治療病理