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1、該研究擬建立獲得可溶性有活性的Endostatin蛋白的中試生產(chǎn)工藝,以獲得足夠量的Endostatin蛋白,以便能研究Endostatin蛋白的抗腫瘤活性和機(jī)制,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)Endostain蛋白為抗腫瘤新藥奠定基礎(chǔ).該研究主要開(kāi)展了如下研究工作:一、重組人融合Endostatin工程菌的研制;二、重組人融合Endostatin的表達(dá)、復(fù)性和純化;三、重組人Endostatin 生物活性研究.通過(guò)該課題研究:1.構(gòu)建了高表達(dá)重組人融合
2、Endostatin的工程菌株.2.建立了中試規(guī)模高密度發(fā)酵工藝條件.3.建立了在Chelating Sepherase FF填料表面原位獲得高比值可溶性重組人Endostatin的復(fù)性方法,其可溶性復(fù)性率達(dá)到國(guó)內(nèi)外最高水平.4.采用His親和、離子交換和分子排阻層析,取得高純度的重組人Endostatin.5.對(duì)重組人Endostatin生物活性進(jìn)行研究.證實(shí)用上述工藝條件制備的重組人Endostatin具有抑制血管內(nèi)皮細(xì) 胞增殖、抑
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