類風濕關(guān)節(jié)炎與巨噬細胞炎性蛋白-1α、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：類風濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎癥為特征的慢性全身自身免疫性疾病。趨化因子產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)與自身免疫性抗體的產(chǎn)生在疾病的發(fā)生和發(fā)展過程中共同起作用。對趨化因子和自身免疫性抗體的研究有助于闡明RA的發(fā)病機制，并將可能成為RA的診斷、治療和判斷預(yù)后的有效指標。本文的目的在于利用實時熒光定量PCR技術(shù)研究CC族趨化因子巨噬細胞炎性蛋白-1α（macrophage inflammatory p

2、rotein-1 alpha，MIP-1α）在RA患者血液、關(guān)節(jié)液的mRNA表達水平，以及MIP-1α、抗環(huán)瓜氨酸抗體（anticyclic citrullinated peptide antibody，anti-CCP antibody）在血清、關(guān)節(jié)液中的濃度，進一步探討MIP-1α與抗CCP抗體關(guān)系，觀察他它們在RA發(fā)病機制中可能起的作用，為RA的早期診斷、治療提供科學依據(jù)。
　　 方法：RA組：共收集18例外周血標本，11

3、例關(guān)節(jié)液標本，其中10例兩者均采集。骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）組：共收集6例外周血標本，2例關(guān)節(jié)液標本。正常對照組：共收集15例外周血標本。以上關(guān)節(jié)液標本均來自膝關(guān)節(jié)液。用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）和關(guān)節(jié)液單個核細胞（synovial fluid mononuclear cell，SFMC）中MIP-1α mRNA表達水平

4、。同時對血清和關(guān)節(jié)液采用ELISA法測定MIP-1α和抗CCP抗體的濃度。
　　 對實驗結(jié)果采用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析，變量間相關(guān)性采用spearman相關(guān)性分析。P<0.05為有顯著性差異。
　　 結(jié)果：
　　 1.RA組MIP-αamRNA的表達。
　　 RA組外周血GAPDH與MIP-1α Ct值的比值為0.6022±0.0279；關(guān)節(jié)液GAPDH與MIP-1α Ct值得比值為0.6934±0

5、.0544，兩組相比有統(tǒng)計學差異（p<0.01）。
　　 2.MIP-1α在血清和關(guān)節(jié)液中的含量。
　　 2.1 RA組血清中MIP-1α的濃度為199.798±55.612pg/mlOA組的濃度為1 16.357±18.471pg/ml，正常對照組的濃度為33.621±12.439pg/ml，RA組與OA組相比、RA組與正常相比、OA組與正常相比均有統(tǒng)計學差異（p<0.01）。
　　 2.2 RA 組關(guān)節(jié)液中

6、MIP-1α 的濃度為449.927±82.236pg/ml，OA組的濃度為170.527±27.41 7pg/ml，兩者相比有統(tǒng)計學差異（p<0.05）。
　　 2.3 RA組血清、關(guān)節(jié)液中MIP-1α的濃度分別為199.798±55.612pg/ml，449.927±82.236pg/ml，兩者相比有統(tǒng)計學意義（p<0.01）。
　　 3.RA組血清、關(guān)節(jié)液中抗CCP抗體的濃度分別為：122.479±85.524RU

7、/ml：104.977±90.479RU/ml，兩者相比無統(tǒng)計學差異（p>0.05）。
　　 4.MIP-1α與抗CCP抗體的相關(guān)性。
　　 4.1 RA組血清中兩者無明顯相關(guān)性（p>0.05）。
　　 4.2 RA組關(guān)節(jié)液中兩者相比無明顯相關(guān)性（p>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.MIP-1α在RA患者中的表達高于OA組和正常對照組，并且RA患者關(guān)節(jié)液中表達遠高于外周血中表達，提示MIP-

8、1α參與炎癥反應(yīng)，招募外周血中的單核細胞進入關(guān)節(jié)炎癥部位，進而在關(guān)節(jié)液中分泌更多的MIP-1α，形成血管翳，最終導致關(guān)節(jié)骨與軟骨結(jié)構(gòu)破壞，MIP-1α在RA發(fā)病機制中起著重要作用。
　　 2.RA患者血清和關(guān)節(jié)液中均含有抗CCP抗體，提示RA患者血清與關(guān)節(jié)液中均含有分泌抗CCP抗體的B細胞。
　　 3.RA患者抗CCP抗體與MIP-1α的濃度無明顯相關(guān)性。說明抗CCP抗體含量的多少并不影響MIP-1α的分泌，兩者相互之間