十字花科黑腐病菌中一類與趨化性相關(guān)的感受蛋白基因的研究.pdf

1、十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris，Xcc)是引起十字花科植物發(fā)生黑腐病的病原菌，該菌同時(shí)也是研究微生物與寄主植物相互作用分子機(jī)理的重要模式菌，研究該菌的致病機(jī)理對(duì)于減少農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)損失具有重大的意義。目前，細(xì)菌的趨化性在病原學(xué)方面的意義已經(jīng)被公認(rèn)。寄主體內(nèi)含有各種化學(xué)物質(zhì)，因此病原菌的趨利避害顯得尤為重要。根據(jù)Xcc8004基因組的注釋，XC_2307、XC_0286、XC_1074

2、、XC_2313、XC_2504、XC_2304、XC_2316、XC_2320、XC_0336、 XC_2306、 XC_2136、XC_1801、XC_1937、XC_2315、XC_2314、XC_0843、XC_1412、XC_1414、XC_2308、XC_1413、XC_2223、XC_2309、XC_2311、XC_0638這24個(gè)基因的編碼產(chǎn)物是趨化蛋白。為了評(píng)估這24個(gè)基因的功能，本研究利用pK18mobSacB對(duì)這些

3、基因分別進(jìn)行突變，構(gòu)建了24個(gè)基因的缺失突變體，并對(duì)這些突變體進(jìn)行表型分析。
　　植株試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與野生型菌株相比較，突變體DM2311基本喪失致病性，DM2223、DM2304、DM1937這三個(gè)突變體的致病性降低了大約30％，它們的互補(bǔ)菌能恢復(fù)野生型的致病力水平。表明XC_2311、XC_2223、XC_2304、XC_1937與病原菌的致病性相關(guān)。對(duì)突變體的生長(zhǎng)分析發(fā)現(xiàn)，DM2311、DM2223、DM2304以及DM1937

4、這四個(gè)突變體在MMX培養(yǎng)基的生長(zhǎng)緩慢，它們的互補(bǔ)菌的生長(zhǎng)與野生型基本一致，表明XC_2311、XC_2223、XC_2304以及XC_1937與菌體繁殖相關(guān);運(yùn)動(dòng)性檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，DM2311、DM2223、DM2304以及DM1937在含0.3％以及0.6％瓊脂糖游動(dòng)板的游動(dòng)性降低，它們的互補(bǔ)菌的游動(dòng)性與野生型基本一致，表明XC_2311、XC_2223、XC_2304以及XC_1937與菌株的游動(dòng)性相關(guān);
　　運(yùn)用毛細(xì)管法檢測(cè)了Xc

5、c8004對(duì)30種化學(xué)物質(zhì)（麥芽糖、葡萄糖、果糖、木糖、乳糖、蔗糖、核糖、阿拉伯糖、甘露醇、酪氨酸、精氨酸、丙氨酸、亮氨酸、絲氨酸、賴氨酸、色氨酸、蘇氨酸、組氨酸、纈氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、氯化鎂、氯化鈣、氯化銨、檸檬酸）的趨化性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)野生型菌株對(duì)18種物質(zhì)（蔗糖、麥芽糖、乳糖、核糖、果糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、半胱氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺、絲氨酸、異亮氨酸、精氨酸、亮氨酸、氯