NIBV對原代雞腎細胞生長及相關(guān)基因表達的影響.pdf

1、為研究NIBV對雞腎細胞活性，抗氧化功能以及與細胞凋亡相關(guān)基因表達量等的影響，探討NIBV的致病機理。本實驗通過已建立的雞腎細胞體外培養(yǎng)模型，用劑量為半數(shù)組織感染量的NIBV病毒感染雞腎細胞，檢測NIBV病毒在腎細胞內(nèi)的動態(tài)復制變化;通過MTT四唑鹽法和乳酸脫氫酶測定試劑盒檢測NIBV病毒對腎細胞活性和細胞膜的損傷情況，用試劑盒測定細胞和細胞培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶和黃嘌呤氧化酶活性、丙二醛和尿酸含量;SYBR-PCR檢測原代雞腎細胞內(nèi)X

2、OD，Bak1，Bcl2，P53，Caspase-3，DDIT3的mRNA相對基因表達量變化。結(jié)果表明:感染NIBV后，雞腎細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化，病毒組細胞活力極顯著下降(P＜0.01)，細胞內(nèi)的病毒粒子數(shù)量先升高后下降，在36 hpi達到最高;與對照組相比，病毒組細胞LDH含量、XOD活性、UA濃度、上清液SOD活性和胞內(nèi)MDA濃度均極顯著升高(P＜0.01);胞內(nèi)SOD活性在72 hpi極顯著下降(P＜0.01);熒光定量P