奧曲肽對兔小梁切除術后瘢痕增殖的影響.pdf

1、目的:小梁切除術是目前最常用的抗青光眼手術方式之一,術后濾過泡的瘢痕化導致的濾過道閉鎖是手術失敗的最主要原因。因此為提高手術成功率,一些抗增殖藥物逐漸應用到手術當中。實踐證明絲裂霉素C(mitomycine-C,MMC)可明顯提高難治性青光眼小梁切除術的成功率,目前將MMC作為金標準。但是MMC在發(fā)揮抗瘢痕作用的同時也產(chǎn)生諸多毒副作用。奧曲肽(octreotide,OCT)是一種生長抑素的類似物,研究發(fā)現(xiàn)其對多種細胞的增殖都有抑制作用,

2、且毒副作用小。
　　 本實驗在兔小梁切除術中鞏膜瓣下應用OCT和/或術前3天點眼,通過觀察濾過泡的形態(tài)及維持時間,眼壓的變化、手術區(qū)域組織的增殖情況、增殖細胞的標記指數(shù)等,評價其對術后濾過道瘢痕增殖有無抑制作用。并與術中鞏膜瓣下應用。MMC作對比以確定其療效。探討術前點眼能否作為一種抑制術后瘢痕增殖的給藥方式。通過術后眼前后節(jié)檢查以及電生理儀器檢查與術前比較測定OCT的安全性。
　　 方法:
　　 1.篩選健康無

3、眼疾的新西蘭大白兔40只,常規(guī)飼養(yǎng)一周。
　　 2.術前常規(guī)測量并記錄每只兔子的眼壓。
　　 3.術前常規(guī)測量并記錄每只兔子的眼電生理。
　　 3.1.做閃光視覺誘發(fā)電位(flash visual evoked potential,F-VEP)檢查,記錄P2波的潛伏期。
　　 3.2.做全視野視網(wǎng)膜電流圖(full-field electroretinogram,FERG)檢查,記錄暗視視桿反應(Rod-

4、R)和暗視混合反應(Max-R)的b波振幅。
　　 4.將40只兔子隨機分成A、B、C、D、E5組各組均由同一術者行雙眼標準小梁切除術。
　　 4.1.A組作為空白對照組:僅行標準小梁切除術。
　　 4.2.B組作為標準對照組:術中將0.2mg/ml MMC的棉片放于鞏膜瓣下5分鐘,然后用100ml生理鹽水充分沖洗。
　　 4.3.C組作為實驗I組:術中將0.1mg/ml的OCT的棉片放于鞏膜瓣下5分鐘,

5、然后用100ml生理鹽水充分沖洗。
　　 4.4.D組作為實驗Ⅱ組:術前3天0.1mg/ml的OCT點眼,每日四次。同時術中將0.1mg/ml的OCT的棉片放于鞏膜瓣下5分鐘,然后用100ml生理鹽水充分沖洗。
　　 4.5.E組作為實驗Ⅲ組:術前3天0.1mg/ml的OCT點眼,每日四次。
　　 5.術后3、7、14、28天時分別觀察每組兔子眼前節(jié)及眼底情況、電生理的變化。觀察并記錄各組眼壓及濾過泡形態(tài)及維持時

6、間。
　　 6.術后3、7、14、28天每組隨機處死兩只兔,摘除眼球,取手術區(qū)全層眼球壁固定、石蠟包埋,制成切片。做HE染色,光鏡下觀察濾過道開放、炎癥反應和細胞增殖情況;經(jīng)Masson三色染色,觀察濾過道新生膠原纖維生成情況;做增殖細胞核抗原(proliferative cell nucleus antigen PCNA)染色,光鏡下計數(shù)濾過道內(nèi)標記細胞與細胞總數(shù)的百分比,即標記指數(shù),從而評價濾過道內(nèi)細胞的增殖程度。
　

7、　 結果:
　　 1.裂隙燈檢查:A、B、C、D、E各組結膜均愈合良好;角膜熒光素染色大部分眼都有不均勻著色,但各組例數(shù)差異無統(tǒng)計學意義,均無角膜水腫;前房均無出血、滲出,無淺前房出現(xiàn)。無白內(nèi)障的發(fā)生。后四組功能性濾過泡的維持時間明顯比A組延長差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 2.眼底鏡檢查;各組均無視網(wǎng)膜或脈絡膜脫離出現(xiàn)。
　　 3.眼電生理檢查:視神經(jīng)以及視網(wǎng)膜均未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應。
　　

8、4.眼壓檢查:各組術后眼壓平均值均較術前降低,術后3天時明顯降低,術后7-14天時略有升高,術后28天時再次降低。各組術前與術后各時間點眼壓值差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);術后3天與術后14天差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),術后14與術后28天差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。其余各時間點之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。五組之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)(見圖1及表2)。
　　 5.病理組織學改變
　　

9、 5.1.HE染色(Fig.2-21):
　　 術后除第3天,各組增殖均不明顯外,其余各時間點B、C、D、E四組術后瘢痕的增殖均較A組減輕。濾過泡和濾過道也更明顯。術后7天時除B組外各組結膜下及濾過道內(nèi)均出現(xiàn)纖維組織的大量增生,較疏松,內(nèi)充滿大量的成纖維細胞,濾過道內(nèi)增殖程度:A＞E＞C＞D＞B組。術后14天時各組增生的纖維組織變得較致密,A組濾過道閉鎖,濾過道內(nèi)增殖程度:A＞E=B=C＞D組。術后28天時A組濾過泡及濾過道均以

10、閉鎖。其余各組濾過泡腔隙存在,濾過道殘留多個小腔隙。濾過道內(nèi)增殖程度:A＞E＞C=B＞D組。
　　 5.2.Masson三色染色(Fig.22-31)
　　 術后3天時各組膠原纖維增生均不明顯。7天時除B組外各組膠原纖維增生均較明顯,均較為纖細、疏松。成纖維細胞較多。于14天時B、E組有中量的膠原纖維生成,而其余各組濾過道區(qū)域均為粗大的膠原纖維,與濾過道周圍原有膠原纖維融合。28天時各組濾過道區(qū)域均為粗大的膠原纖維,與濾

11、過道周圍原有膠原纖維融合。各組的增殖程度與HE染色結果一致。
　　 5.3.PCNA染色(Fig.32-40)
　　 術后各個時間點細胞的標記指數(shù)(見表6),術后7天時A組高于B、C、D、E三組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.005),B、C、D、E四組之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.005)。術后14天時A、B組高于C、D、E三組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.005),A、B兩組之間以及C、D、E三組之間差異無統(tǒng)計學意義(]P

12、＞0.005)。術后28天時,A、B、C、D、E五組之間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結論:
　　 1.OCT鞏膜瓣下應用或術前3天局部點眼,能有效抑制手術區(qū)域瘢痕的增殖。
　　 2.OCT鞏膜瓣下應用抗瘢痕增殖遠期效果優(yōu)于術前3天局部點眼用藥。
　　 3.鞏膜瓣下應用聯(lián)合術前3天局部點眼抗增殖作用明顯增強。
　　 4.濃度為0.1mg/ml的OCT與濃度為0.2mg/ml MMC抗增