EGCG誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞凋亡及其分子機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的：觀察表沒食子兒茶素沒食子酸酯（Epigallocatechin-3-gallate，EGCG）誘導(dǎo)人胃癌BGC-823細(xì)胞凋亡的生物學(xué)效應(yīng)及初步探討其作用分子機(jī)制。 方法：通過MTT比色法檢測EGCG對BGC-823細(xì)胞生長的影響；用形態(tài)學(xué)觀察、PI流式細(xì)胞術(shù)和DNA瓊脂糖凝膠電泳研究EGCG誘導(dǎo)BGC-823細(xì)胞凋亡作用。免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測EGCG處理后BGC-823細(xì)胞Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表達(dá)，

2、Western blot法檢測EGCG處理后BGC-823細(xì)胞NF-kB （p65）、Bcl-2、Bax、Caspase-3和PARP蛋白的表達(dá)。 結(jié)果： EGCG顯著抑制人胃癌BGC-823細(xì)胞的生長，呈濃度和時(shí)間依賴性；EGCG（40 μg/ml）處理BGC-823細(xì)胞48 h后，光鏡和熒光顯微鏡下觀察到，細(xì)胞體積縮小，核固縮，呈典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果表明不同濃度EGCG（20 μg/ml、40 μg/ml

3、、80 μg/ml）處理BGC-823細(xì)胞48 h和同一濃度EGCG（40 μg/ml）分別處理BGC-823細(xì)胞24 h、48 h、72 h后，亞G1期細(xì)胞累積均逐漸增加；EGCG（80 μg/ml）分別作用BGC-823細(xì)胞48 h和72 h后，DNA凝膠電泳出現(xiàn)典型梯形條帶；免疫細(xì)胞化學(xué)法結(jié)果表明EGCG（40 μg/ml）處理BGC-823細(xì)胞48 h后， Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)，Bax蛋白表達(dá)上調(diào)，Caspase-3蛋白表達(dá)上