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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮能否逆轉(zhuǎn)SGC7901/VCR細(xì)胞祼鼠皮下移植瘤對(duì)絲裂霉素(MMC)的耐藥作用及其程度,從誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡方面初步探討ROS逆轉(zhuǎn)SGC7901/VCR多藥耐藥的作用及機(jī)制。
方法:
收集人胃癌SGC7901/VCR細(xì)胞后接種于裸鼠背部皮下,觀察移植后裸鼠的成瘤情況,篩選成瘤的裸鼠。術(shù)后兩周將成瘤的裸鼠分為六組:空白對(duì)照組、生理鹽水0.2ml.2d-1(A組)、絲裂霉素2.
2、5mg.kg-1.2d-1組(B組)、羅格列酮100mg.kg-1.2d-1組(C組)、羅格列酮50mg.kg-1.2d-1+絲裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(D組)、羅格列酮100mg.kg-1.2d-1+絲裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(E組)、環(huán)孢霉素50mg.kg-1.2d-1+絲裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(F組)。每組8只裸鼠,待移植瘤長(zhǎng)至大小約100mm3時(shí)開始分別給每組裸鼠灌胃給藥(均為隔日一次),其
3、中絲裂霉素腹腔注射給藥,生理鹽水、羅格列酮、環(huán)孢霉素灌胃。每6日分別測(cè)量每只裸鼠移植瘤的大小并給裸鼠稱重,并據(jù)此繪制移植瘤的生長(zhǎng)曲線;第40天后處死成瘤裸鼠,檢測(cè)各組移植瘤的大小、重量,計(jì)算抑瘤率;DNA Ladder觀察移植瘤組織的凋亡情況;Real-Time PCR檢測(cè)P-Akt、Bcl-2、Bax mRNA表達(dá); Western-blot檢測(cè)P-Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:
1、裸鼠體重:處死
4、前各組裸鼠體重差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);
2、用藥后對(duì)移植瘤體積的影響:A組、B組移植瘤瘤體積差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),C組、D組、E組、F組與A組、B組比較移植瘤瘤體積差別有顯著意義(P<0.05),以E組、F組移植瘤瘤體積最小;
3、DNA Ladder結(jié)果顯示:B組和A組無(wú)明顯凋亡,C組存在弱的凋亡, MMC與ROS聯(lián)用,隨ROS劑量增加,凋亡明顯增強(qiáng),呈現(xiàn)明顯的DNA梯度, E組略強(qiáng)于F組。<
5、br> 4、用藥后對(duì)移植瘤組織P-Akt、Bcl-2、Bax mRNA表達(dá)的影響: A組、B組P-Akt、Bcl-2 mRNA表達(dá)最強(qiáng),B組與A組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05),C組、D組、E組、F組表達(dá)依次減弱,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),E組與F組表達(dá)最弱,E組與F組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05);Bax mRNA以A組表達(dá)最弱,B組與A組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05),C組、D組、E組表達(dá)依次增強(qiáng),差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意
6、義(P<0.05)。E組與F組表達(dá)最強(qiáng),E組與F組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
5、用藥后對(duì)移植瘤組織P-Akt、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響: A組、B組P-Akt、Bcl-2蛋白表達(dá)最強(qiáng),B組與A組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05),C組、D組、E組表達(dá)依次減弱,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),E組與F組表達(dá)最弱, E組與F組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05);Bax蛋白以A組最低,B組與A組比較差異無(wú)顯著性(P
7、>0.05),C組、D組、E組表達(dá)依次增強(qiáng),差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。E組與F組蛋白表達(dá)最強(qiáng),E組與F組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
結(jié)論:
1、羅格列酮可抑制人胃癌SGC7901/VCR祼鼠移植瘤瘤體生長(zhǎng),誘導(dǎo)祼鼠移植瘤組織中SGC7901/VCR細(xì)胞的凋亡,且部分逆轉(zhuǎn)其對(duì)絲裂霉素的耐藥性;
2、羅格列酮可部分逆轉(zhuǎn)其對(duì)絲裂霉素的耐藥性,其機(jī)制可能是通過下調(diào)PI3K/Akt信號(hào)通路中p-Ak
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