鉤吻素子的提取分離及對(duì)銀屑病的實(shí)驗(yàn)治療.pdf

1、鉤吻(GEB)又名斷腸草、毒根、大茶藥、胡蔓藤、野葛等，為馬錢科植物胡蔓藤的根、莖、葉。性溫味辛、苦，有大毒。國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道鉤吻總堿具有多方面的藥理作用，如鎮(zhèn)痛、散瞳、促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，及較強(qiáng)抗炎、抑制血小板聚集的作用；有些科研單位以口服鉤吻粉劑或用鉤吻總堿注射液來(lái)治療肝癌、胃癌、食道癌等。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，鉤吻總堿還具有抗乙酰膽堿能神經(jīng)作用，其提取物具有較強(qiáng)細(xì)胞毒性。近年來(lái)，國(guó)外已將鉤吻提取物制成口服液劑型來(lái)治療一些皮膚炎癥、神經(jīng)性水

2、腫及調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)。尤為重要的是，已將鉤吻制成注射液，用于銀屑病、紅斑狼瘡治療，取得較為理想的臨床效果。 銀屑病又名牛皮癬，是一種以表皮細(xì)胞過(guò)度增殖與異常分化為特征的慢性炎癥性皮膚病。此種疾病發(fā)病率較高，且反復(fù)發(fā)作，難以治愈，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和生命健康，是皮膚病學(xué)領(lǐng)域中主要的研究?jī)?nèi)容。目前國(guó)內(nèi)外治療銀屑病的藥物都是從系統(tǒng)抗腫瘤藥、抗代謝藥、抗炎和免疫調(diào)節(jié)劑中移植過(guò)來(lái)，由于嚴(yán)重的毒副作用，而限制其臨床應(yīng)用。迄今在治療銀屑病的藥

3、物中，未能有一個(gè)各方面都較理想的藥物。 本課題針對(duì)上述問題，利用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)對(duì)我國(guó)植物資源豐富的鉤吻進(jìn)行抗銀屑病作用研究。首先通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件，在最佳工藝條件下提取最高含量的總生物堿；進(jìn)一步分離得到鉤吻素子單體，采用薄層色譜、紅外光譜、紫外光譜及核磁共振對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定；進(jìn)而將其應(yīng)用于銀屑病樣動(dòng)物模型的治療，進(jìn)行初步的藥效學(xué)研究，并測(cè)定血清中細(xì)胞因子IL-2水平的變化，探討鉤吻素子的作用機(jī)理，為其應(yīng)用于銀屑病的治療提供理

4、論依據(jù)。 目的： 1.優(yōu)選簡(jiǎn)便高效的鉤吻生物總堿的提取工藝，考察不同提取條件下的提取率，在最佳工藝下提取總生物堿；并研究總生物堿中含量最高、毒性相對(duì)較低的成分之一鉤吻素子(Koumine，Kou)的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定方法。 2.建立小鼠陰道上皮及鼠尾鱗片表皮銀屑病模型，將Kou作用于此模型，觀察Kou對(duì)小鼠陰道上皮細(xì)胞有絲分裂指數(shù)及尾部表皮顆粒層形成的影響，測(cè)定小鼠血清中細(xì)胞因子IL-2的水平，探討Kou治療銀屑

5、病的可能機(jī)制。 結(jié)論： 1.以氯仿作為提取溶劑，固液比例1.0：7.5，回流時(shí)間3h×3是提取鉤吻總生物堿的最佳工藝條件。 2.經(jīng)薄層色譜定性鑒別和光譜法結(jié)構(gòu)鑒定，本實(shí)驗(yàn)中分離得到的無(wú)色棱柱狀結(jié)晶為鉤吻素子(Kou)單體。 3.Kou可抑制模型小鼠表皮細(xì)胞過(guò)度增殖和使表皮角化不全轉(zhuǎn)向正常角化，因而具有一定的抗銀屑病活性。 4.Kou抗銀屑病的作用可能是通過(guò)降低血清IL-2水平，抑制過(guò)高的細(xì)胞免疫，