姜黃素前體藥物FM0806的體內(nèi)外穩(wěn)定性及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、研究背景：姜黃素(Curcumin，Cur)是從姜科姜黃屬植物姜黃、莪術(shù)、郁金等的根莖中提取的有效成分，具有抗腫瘤、抗炎、抗人類免疫缺陷病毒、抗膽固醇、抗氧化等多種藥理作用，具有良好的臨床應(yīng)用潛力。但Cur不穩(wěn)定，在體內(nèi)代謝迅速，生物利用度低，體內(nèi)難以達到有效濃度，嚴重制約了姜黃素開發(fā)成有效的抗癌藥。因此改善Cur藥代動力學特征、提高其體內(nèi)的抗癌活性成為國際上的難點和熱點。我們對其結(jié)構(gòu)進行了修飾，制備成姜黃素的前體藥物FMO806，并對

2、其藥學穩(wěn)定性、抗腫瘤活性及藥代動力學方面進行了初步的探索。 研究目的：研究姜黃素前體藥物的穩(wěn)定性及其抗腫瘤作用。 研究方法：(1)影響因素試驗觀察FMO806的初步穩(wěn)定性；(2)利用HPLC法測定FMO806在不同pH值的緩沖溶液、血漿中藥物水解動力學；(3) MTT法體外測定FMO806對多種癌細胞及正常細胞的影響；(4)血清藥理學實驗觀察代謝物對癌細胞增殖的抑制作用；(5)采用HPLC-MS、HPLC鑒定及檢測FMO

3、806及其代謝產(chǎn)物濃度；(6)應(yīng)用H22小鼠移植腫瘤模型進行體內(nèi)實驗，觀察FMO806的抗腫瘤活性并與等摩爾的姜黃素進行比較；(7)應(yīng)用人慢性粒細胞白血病K562細胞裸鼠移植瘤模型進行體內(nèi)實驗，觀察FMO806的抗腫瘤活性；(8)采用免疫組化技術(shù)(SP兩步法)觀察FMO806在產(chǎn)生抑瘤作用的同時對K562腫瘤組織中特異Bcr/abl蛋白表達水平的影響。 研究結(jié)果：(1) FMO806在高溫、高濕、光照條件下相對較穩(wěn)定，各項考察指

4、標無明顯變化；(2) FMO806在pH為2～10時水解速率常數(shù)不受pH影響，而在血漿及肝勻漿中FMO806可迅速代謝為原形藥物發(fā)揮藥效，可見FMO806具有前藥的特性；(3)該藥在高達1 mg/ml以上濃度仍無細胞毒作用；(4)100 mg/kg給藥，經(jīng)體內(nèi)代謝活化，其含活性代謝物的血清5-10倍稀釋后對癌細胞仍具有顯著的抑制作用并能下調(diào)P210蛋白含量及下調(diào)其下游相關(guān)蛋白；(5)FMO806有良好的藥代動力學特征，在體內(nèi)能夠水解釋放

5、出高濃度的姜黃素，使姜黃素在體內(nèi)的半衰期延長近10倍，與給予等劑量姜黃素比較，F(xiàn)MO806在體內(nèi)釋放出姜黃素的AUC高約20倍；(6)該藥50-100 mg/kg不論口服還是靜脈給藥，對小鼠肝癌H22的體內(nèi)抑瘤率為40-75％，均顯著高于等摩爾姜黃素給藥組(P<0.05)；(7)40-60 mg/kg口服給藥對人慢性粒細胞白血病K562細胞株接種于裸鼠構(gòu)建的模型，體內(nèi)抑瘤率可高達60％；(8)免疫組化結(jié)果表明與對照組相比，實驗組腫瘤組織