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1、目前有關(guān)泥鰍免疫增強(qiáng)劑的研究與應(yīng)用報(bào)道較少。免疫抑制模型和天然免疫增強(qiáng)劑的研發(fā)對(duì)泥鰍的生態(tài)養(yǎng)殖與疾病的免疫預(yù)防具有重要意義。本文以環(huán)磷酰胺為免疫抑制劑,探討建立大鱗副泥鰍免疫抑制實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷姆椒?,并在黃芪多糖對(duì)健康大鱗副泥鰍免疫功能影響研究的基礎(chǔ)上,考察黃芪多糖對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制大鱗副泥鰍的免疫調(diào)節(jié)作用?,F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下:
1、為研究黃芪多糖(APS)對(duì)健康大鱗副泥鰍免疫功能的影響,在基礎(chǔ)飼料中分別添加0(對(duì)照組)、5
2、0、100、200和400 mg/kg的黃芪多糖(APS),連續(xù)投喂大鱗副泥鰍28天,分別在試驗(yàn)開始后的第7、14、21、28天采集各組的血液和肝胰臟樣本,檢測(cè)APS對(duì)大鱗副泥鰍非特異性免疫反應(yīng)的影響。結(jié)果顯示:50~400 mg/kg APS能顯著提高大鱗副泥鰍的紅細(xì)胞數(shù)(RBC)和白細(xì)胞數(shù)(WBC)(P<0.05);顯著提高血清溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、肝胰臟總超氧化物岐化酶(T-SOD)和過氧化
3、氫酶(CAT)活性(P<0.05);顯著降低肝胰臟谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性及丙二醛(MDA)含量(P<0.05);50、100 mg/kg APS能顯著提高血清補(bǔ)體C3含量(P<0.05);投喂APS后第1周100 mg/kg組和第2周50 mg/kg組血清NO含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05);第3周50、100和400 mg/kg組,第4周50和100 mg/kg組的血清NO含量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)
4、??傮w而言,在50~400 mg/kg APS是較為合適的飼料添加水平,但根據(jù)效果相當(dāng)、小劑量?jī)?yōu)先原則,建議在大鱗副泥鰍疾病預(yù)防,提高魚體免疫力時(shí),飼料中的適宜添加量為50 mg/kg。
2、為構(gòu)建大鱗副泥鰍免疫抑制模型,以0(對(duì)照組)、100、200、300 mg/kg體重的環(huán)磷酰胺(CYP)對(duì)大鱗副泥鰍腹腔注射1次,對(duì)照組注射等量的0.85%生理鹽水,在注射CYP后的第4、8、12、16天采樣檢測(cè)4個(gè)處理組的RBC、WBC
5、、血清NO含量、補(bǔ)體C3含量、LSZ、ACP、AKP、肝胰臟SOD活性及MDA含量。結(jié)果顯示:對(duì)大鱗副泥鰍腹腔注射一定劑量的 CYP,能顯著降低試驗(yàn)魚 RBC、WBC、血清補(bǔ)體C3含量、LSZ、ACP、AKP及肝胰臟SOD活性,顯著增加血清NO含量和肝胰臟MDA含量(P<0.05);試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在注射CYP后的第8天,免疫抑制效果最佳。因此可采用CYP構(gòu)建大鱗副泥鰍免疫抑制模型,綜合考慮效果和成本,CYP的適宜注射劑量為200 mg/kg
6、體重。
3、為研究大鱗副泥鰍在免疫抑制情況下,AP S對(duì)其免疫調(diào)節(jié)作用,在基礎(chǔ)飼料中分別添加0(對(duì)照組)、0(模型組)、100、200和400 mg/kg的黃芪多糖,連續(xù)投喂大鱗副泥鰍28天,在試驗(yàn)開始后的第15天,對(duì)模型組、100 mg/kg組、200 mg/kg組和400 mg/kg組泥鰍按200 mg/kg體重的劑量一次性腹腔注射環(huán)磷酰胺(0.1 mL/尾),對(duì)照組注射等量的0.85%生理鹽水。在注射環(huán)磷酰胺后的第4、8
7、、12天采集各組的血液和肝胰臟樣本,檢測(cè)黃芪多糖對(duì)免疫抑制大鱗副泥鰍非特異性免疫反應(yīng)的影響。結(jié)果顯示:在注射CYP后的第4、8和12天,模型組的WBC,血清 LSZ、ACP和 AKP活性,肝胰腺 CAT活性和 T-AOC均顯著低于對(duì)照組(P<0.05);100、200和400 mg/kg APS組的血清LSZ、ACP、AKP活性及肝胰腺T-AOC幾乎均顯著高于模型組(P<0.05);在注射CYP后的第4天和第8天,模型組的肝胰臟MDA含
8、量較對(duì)照組顯著增加(P<0.05),200 mg/kg APS組的肝胰臟MDA含量顯著低于模型組(P<0.05);在注射 CYP后的第8天,模型組的 RBC和血清補(bǔ)體C3含量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05),100和200 mg/kg APS組的RBC、血清補(bǔ)體C3含量均顯著高于模型組(P<0.05);在注射CYP后的第4天,100、200和400 mg/kg APS組的WBC均顯著高于模型組(P<0.05)。由此表明,CYP成功誘導(dǎo)大
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