AT1R在腎血管性高血壓大鼠腸系膜動脈eNOS磷酸化調控中的作用.pdf

1、目的：以腎血管性高血壓大鼠為研究對象，探討在高血壓的發(fā)生發(fā)展過程中，AT1R在腸系膜動脈內皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)磷酸化調控中的作用。
　　方法：采用成年雄性SD大鼠，雙腎單夾法狹窄右側腎動脈復制腎血管性高血壓大鼠(two-kidney one-clip renovascular hypertensive rats,2K1C RHR)模型，設立Sham-4周(

2、w)組(n=8)和Sham-8w組(n=18)、2K1C-4w組(n=8)和2K1C-8w組(n=18)、AT1R阻滯劑(AngⅡtype1 receptor blocker，ARB)治療組(n=18)。采用無創(chuàng)血壓測試儀檢測大鼠尾動脈收縮壓。至各組觀測時間結束后處死大鼠，留取腸系膜動脈。采用Western Blotting方法檢測各組大鼠腸系膜動脈組織eNOS總蛋白的表達、eNOS Ser1179、eNOS Ser635、eNOS T

3、hr497位點的磷酸化水平變化，Akt總蛋白的表達、Akt Thr308、Akt Ser473位點的磷酸化水平變化以及蛋白磷酸酶(protein phosphatase，PP)PP1、PP2A蛋白表達的變化。采用化學比色法檢測腸系膜動脈組織一氧化氮(nitric oxide，NO)的含量。
　　結果：①與Sham組比較，2K1C術后2w血壓開始明顯升高（P＜0.05）；ARB治療組在給予AT1R阻滯劑坎地沙坦酯片灌胃4w后血壓明顯

4、降低（P＜0.05）；②與 Sham-4w組比較，2K1C-4w組Akt Ser473位點磷酸化水平明顯降低（P＜0.05），eNOS總蛋白、eNOS Ser1179、eNOS Ser635、eNOS Thr497位點磷酸化水平、Akt總蛋白、Thr308位點磷酸化水平及 PP1、PP2A蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學意義；③與 Sham-8w組比較，2K1C-8w組的eNOS Ser1179、eNOS Ser635、Akt Ser473位點

5、磷酸化水平明顯降低（P＜0.05），eNOS總蛋白、eNOS Thr497位點磷酸化水平、Akt總蛋白、Thr308位點磷酸化水平及 PP1、PP2A蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學意義；④與2K1C-8w組比較，ARB治療組的eNOS Ser1179、eNOS Ser635、Akt Ser473位點磷酸化水平明顯增高（P＜0.05），eNOS總蛋白、eNOS Thr497位點磷酸化水平、Akt總蛋白、Thr308位點磷酸化水平及 PP1、PP

6、2A蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學意義；⑤與 Sham-8w組比較，2K1C-8w組NO含量顯著降低（P＜0.05），與2K1C-8w組比較，ARB治療組NO含量明顯增高（P＜0.05）。
　　結論：2K1C大鼠術后2w時血壓明顯升高，2K1C-4w組腸系膜動脈Akt Ser473位點磷酸化水平降低，2K1C-8w組腸系膜動脈Akt Ser473、eNOS Ser1179、eNOS Ser635位點磷酸化水平降低，NO產(chǎn)量明顯降低，這可

7、能是在血壓升高過程中造成血管內皮細胞損傷所致。eNOS Ser1179位點磷酸化水平降低可能與Akt Ser473位點磷酸化水平下調有關，與PP1、PP2A蛋白表達無關。應用ARB治療后可以明顯提高Akt Ser473、eNOS Ser1179、eNOS Ser635位點的磷酸化水平，提示血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)和內皮細胞膜上的AT1R結合后，抑制了 PI3K/Akt信號通路，Akt Ser473位點磷酸化水平降低，進一步使 eNOS