靶向線粒體肽對碘造影劑致高膽固醇血癥大鼠急性腎損傷的保護作用.pdf

1、背景:造影劑急性腎損傷(Contrast media-induced acute kidneyinjury,CIAKI)已成為當前院內(nèi)發(fā)生急性腎損傷(Acute kidneyinjury,AKI)的第三位常見因為,研究表明氧化應(yīng)激在CIAKI中起重要作用,NADPH氧化酶是產(chǎn)生活性氧的主要來源；靶向線粒體肽能清除細胞內(nèi)活性氧,減少細胞線粒體ROS產(chǎn)生,抑制脂質(zhì)過氧化；然而NADPH氧化酶及靶向線粒體肽在CIAKI中的作用未見文獻報道。<

2、br>　　 目的:研究氧化應(yīng)激、NADPH氧化酶和線粒體能量代謝在高膽固醇血癥大鼠CIAKI中的作用；探討靶向線粒體肽(MTP131.SPI20)對高膽固醇血癥大鼠CIAKI的保護作用及機制。
　　 方法:40只雄性SD大鼠隨機分為先將大鼠隨機分為兩組:正常飲食組8只(NN組),高膽固醇飲食組32只(H組,4％膽固醇和1％膽酸鈉)。正常組大鼠因低體重死亡一只,高膽固醇飲食組死亡四只,繼續(xù)高膽固醇飲食的大鼠隨機分為4組,每組7只

3、,分別為高膽固醇飲食組(HN組)、高膽固醇飲食+造影劑組(HH組)、高膽固醇飲食+造影劑+MTP131(HM組)、高膽固醇飲食+造影劑+SPI20(HS組)。NN組和HN組大鼠分別從尾靜脈注射等量生理鹽水10ml/kg,HH組、HM組和HS組大鼠從尾靜脈注射(76％泛影葡胺)造影劑,注射劑量均為10ml/kg,建立高膽固醇血癥大鼠造影劑急性腎損傷模型。HM組和HS組大鼠在注射造影劑前24 h和30min及注射造影劑后24h分別經(jīng)腹腔注射

4、MTP131和SPI20(每次3 mg/kg)。注射造影劑前和后48 h收集尿標本,經(jīng)眼球取血,檢測尿肌酐、尿鉀、尿鈉和血清肌酐、血鉀、血鈉、血膽固醇、血甘油三酯。注射造影劑后48 h,采用10％水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后處死大鼠,取左腎制備腎組織勻漿,分別用于測脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和ATP酶活性；取右腎下極組織采用10％福爾馬林固定,石蠟包埋、切片,HE染色,觀察腎臟的病理改變；其余部分

5、裝入凍存管中,保存于液氮中用于提取組織蛋白檢測腎組織NADPH氧化酶活性及Western blot檢測腎組織NOX4表達。
　　 結(jié)果:注射造影劑前,與NN組比較各組大鼠血膽固醇水平顯著增高(P<0.01),各組大鼠體重、血清肌酐、血甘油三酯、內(nèi)生肌酐清除率、鉀鈉排泄分數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。注射造影劑后48h,與NN組比較,HN組大鼠血清肌酐、腎小管損傷分數(shù)和腎組織NADPH氧化酶活性增高(P值分別P<0.05,P<0.001,

6、P<0.001)；HH組大鼠血清肌酐、鉀鈉排泄分數(shù)、腎組織勻漿MDA含量明顯升高(P<0.01),腎小管損傷分數(shù)和腎組織NADPH氧化酶活性顯著增高(P<0.001),內(nèi)生肌酐清除率、腎組織勻漿SOD和ATP酶活性顯著下降(P<0.01),腎組織NOX4蛋白表達明顯上調(diào)(P<0.05)。與HN組比較,HH組大鼠血清肌酐、鉀鈉排泄分數(shù)、腎組織勻漿MDA含量、腎小管損傷分數(shù)、腎組織NADPH氧化酶活性明顯升高(P<0.01),內(nèi)生肌酐清除率

7、、腎組織勻漿SOD和ATP酶活性下降(P<0.05),腎組織NOX4蛋白表達上調(diào)(P<0.05)。與模型組比較,MTP131和SPI20干預(yù)組大鼠血清肌酐、鉀鈉排泄分數(shù)、腎臟組織勻漿MDA含量顯著降低(P<0.05),腎組織勻漿SOD和ATP酶活性顯著升高(P<0.05),腎小管損傷分數(shù)明顯減少(P<0.001),腎組織NADPH氧化酶活性及NOX4蛋白表達下調(diào)(P值分別P<0.001,P<0.05)。
　　 結(jié)論:氧化應(yīng)激、N