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文檔簡(jiǎn)介
1、本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外LPS刺激小鼠肺PAM在細(xì)胞水平模擬急性肺損傷,觀察異丙酚對(duì)LPS刺激小鼠PAM中NF-κB活化的影響,從而進(jìn)一步探討異丙酚對(duì)NF-κ B激活通道的影響及其在ALI中可能的抗炎作用。方法:將培養(yǎng)好的小鼠肺泡巨噬細(xì)胞接種在底部放有玻片的12孔培養(yǎng)板中,使小鼠巨噬細(xì)胞均勻地貼壁生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)分為L(zhǎng)PS刺激組(加LPS10 μg/ml)、異丙酚干預(yù)組1(同時(shí)加入LPS10 μ g/ml和異丙酚1 μ g/ml)、異丙酚干預(yù)組2(同
2、時(shí)加入LPS10μ g/ml和異丙酚4μg/ml)異丙酚干預(yù)組3(同時(shí)加入LPS10μ g/ml和異丙酚16μ g/ml)四組。各組PAM在刺激0.5、1、2和4h分別用丙酮固定。用免疫組化的研究方法觀察各組PAM中NF-κB的激活情況,并用圖像分析的方法對(duì)結(jié)果進(jìn)行研究。同時(shí)用ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中的TNF-α濃度。結(jié)論:肺巨噬細(xì)胞在接受LPS刺激后,引起NF-κ B活性的增加,并引起TNF-α的釋放。其中NF-κB的迅速活化可能
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