c型凝集素lsectin作為丙型肝炎病毒受體的系統(tǒng)分析

1、?！?576乏6分類號UDC密級保密期限博士學(xué)位論文題目鯉燧巡也勉塑逝壟夔遜歪必作者姓名——一率11T卜厶一————————————————————一———————————————————————————一指導(dǎo)教師一賀疊塑瞳培養(yǎng)單位一芏奎匡堂盤堂瞳筮盟魚塹盟匿堂盟窒塹專業(yè)名稱——紐胞生塹堂論文提交日期——2006年5月15日學(xué)位授予單位主國△氐鯉筮至芏主醫(yī)堂盤鱟瞳中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院制中文摘要丙型肝炎病毒(HCV)是導(dǎo)致肝臟炎

2、癥的主要病毒之一。目前全世界有17億人感染Hcv，大部分患者發(fā)展成慢型肝炎，有些進一步發(fā)展為肝硬化和肝細胞性肝癌。HCV引起肝病的機制還不是很清楚。研究者利用病毒樣顆粒、可溶性HCV膜糖蛋白E2和HCV假型病毒顆粒發(fā)現(xiàn)了CD81、SR—BI等潛在的HCV受體，然而這些受體在人體內(nèi)廣泛表達，不能解釋HcV感染的組織特異性。最近的研究發(fā)現(xiàn)一些肝臟特異表達的分子雖然不是感染所必需的，但是能夠有效地以反式感染方式提高HCV感染效率如DC—SIG

3、NR。LSECtin是我室克隆鑒定的一種新的II型C型凝集素，特異性地表達在肝竇和淋巴結(jié)竇內(nèi)皮細胞表面。LSECtin能夠結(jié)合甘露糖、巖藻糖和N一乙酰葡糖胺，與同一家族的HCV受體DC—SIGNR具有相似的基因和蛋白結(jié)構(gòu)，共定位于肝竇內(nèi)皮細胞。這提示LSECtin可能結(jié)合HCV，并且與DC—SIGNR相互作用參與結(jié)合HCV，參與感染過程。我們用HCV患者血清、可溶性糖蛋白E2和NCV假病毒顆粒檢測HCV與LSECtin的結(jié)合，并且采用免

4、疫共沉淀技術(shù)和細胞粘附實驗檢測LSECtin與DC—SIGNR的相互作用。結(jié)果表明LSECtin能夠結(jié)合血清中的病毒顆粒，這種結(jié)合可能是通過與HCV表面的糖蛋白相互作用實現(xiàn)的，LSECtin結(jié)合HCV假病毒顆粒的能力低于DC—S16NR。結(jié)合抑制實驗顯示其結(jié)合受到鈣離子拮抗劑EGTA抑制，但是不能被甘露聚糖抑制，提示LSECtin是通過其C型凝集素樣結(jié)構(gòu)域(CTLD)識別E2糖蛋白上非甘露糖的特異性糖基。同時還發(fā)現(xiàn)LSECtin和DC—

5、SIGNR存在相互作用，LSECtin頸區(qū)的coiled—coll域為相互作用所必需。LSECtin和DC—SIGNR共表達的細胞結(jié)合IICV能力較單獨表達DC一$1GNR的細胞降低，提示二者的相互作用可能是改變細胞結(jié)合能力的原因。本研究鑒定了一個新的HCV受體——LsECtin，它在體內(nèi)肝竇內(nèi)皮細胞上與DC—SIGNR共同參與與HCV的結(jié)合，這提示HCV反式感染可能是一個更為復(fù)雜的過程，并且為研究抑制HCV入胞藥物提供了新的藥物靶點。