C型凝集素和TOLL受體在羅氏沼蝦先天免疫中的功能研究.pdf

1、免疫系統(tǒng)包括先天免疫和適應性免疫。無脊椎動物缺乏適應性免疫系統(tǒng)，并依靠先天免疫來保護他們免受病原體和微生物的侵染。本文以羅氏沼蝦為研究對象，對其模式識別和免疫相關信號途徑進行了研究。
　　(1)C型凝集素(CTL)是在脊椎動物和無脊椎動物的先天免疫中起重要作用的模式識別蛋白。
　　本課題從羅氏沼蝦中克隆到一條C型凝集素，命名為MrLec。MrLec的cDNA全長為1431bp，其開放閱讀框為1041bp，編碼一個含346個氨

2、基酸殘基的蛋白。MrLec的信號肽長為18個氨基酸，另外含有一個長為122個氨基酸的單個碳水化合物識別結構域。系統(tǒng)發(fā)育分析表明MrLec與脊椎動物為一個分支，并且與日本囊對蝦中的CTL3具有57％的相似性。組織表達分析表明，MrLec在腸中具有較高的表達水平，在血細胞，心臟，肝胰腺，鰓和胃中表達水平較低。在受到副溶血弧菌刺激后，MrLec在鰓和腸中的表達量上升。在受到白斑綜合征病毒(WSSV)攻擊的24，36和48小時，MrLec在腮中

3、的表達量均上調(diào)。同時，MrLec在腸道中的表達量在36和48小時后也上調(diào)。MrLec重組蛋白可以在鈣離子存在的情況下凝集細菌并且結合革蘭氏陽性菌和陰性菌。另外MrLec重組蛋白可以結合脂多糖和肽聚糖，并且可以在蝦體內(nèi)促進機體對弧菌的清除作用。這些結果表明MrLec參與羅氏沼蝦的免疫反應。
　　(2)Toll受體作為模式識別受體在無脊椎動物的先天免疫反應中起著至關重要的作用。
　　在這項研究中，我們從羅氏沼蝦中發(fā)現(xiàn)了一種Tol

4、l受體并將它命名為MrToll。其cDNA全長為4257bp，編碼1367個氨基酸。它含有17個LRR結構域，1個跨膜結構域和1個TIR結構域。構建的系統(tǒng)進化樹分析表明MrToll與果蠅中的Toll7和其他節(jié)肢動物的Toll為一個分支。在mRNA水平上，MrToll主要分布于羅氏沼蝦的心臟，肝胰腺，腮，胃和腸。在血細胞和淋巴細胞中，MrToll的表達量較低。在受到白斑病毒刺激后的24至48小時，MrToll在腮中的表達量逐漸上調(diào)。在羅氏