15292.pcdna3.1pdgfgal在neuro2a細胞的表達及其對細胞增殖和周期的影響_第1頁
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文檔簡介

1、分類號：Q9533單位代碼：10114密級：學號：201010056pcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGALpcDNA3.1PDGFGAL在在在在Neuro2aNeuro2aNeuro2aNeuro2a細胞的表達細胞的表達細胞的表達細胞的表達及其對細胞增殖和周期的影響及其對細胞增殖和周期的影響及其對細胞增殖和周期的影響及其對細胞增殖和周期的影響研究生：榮曼指導教師：劉田福教授學位類型：科

2、學學位專業(yè)名稱：動物學研究方向：人類疾病模型所在學院：基礎醫(yī)學院二○一三年三月山西醫(yī)科大學碩士學位論文3目錄中文摘要中文摘要..............................................................................................................................................................

3、............................................................................................................................................................................................................................

4、..............................................................................................................................................................................................................1111ABSTRACTAB

5、STRACTABSTRACTABSTRACT......................................................................................................................................................................................................

6、............................................................................................................................................................................................................................

7、..............................................................................................................................................3333插圖、附表清單插圖、附表清單............................................................

8、............................................................................................................................................................................................................................

9、............................................................................................................................................................................................................................

10、....................................5555主要符號中英文對照表主要符號中英文對照表................................................................................................................................................................

11、............................................................................................................................................................................................................................

12、............................................................................................................6666前言..........................................................................................................

13、......................................7材料和方法..........................................................................................................................................91實驗材料................................

14、..........................................................................................................91.1細胞：...........................................................................................................

15、...............................91.3主要試劑......................................................................................................................................91.4主要儀器.......................................

16、..............................................................................................121.5主要試劑配制...................................................................................................................

17、.........132實驗方法........................................................................................................................................182.1目的片段PDGFGAL的擴增.................................................

18、.................................................182.2重組質粒PMDTPDGFGAL的構建及鑒定...........................................................................192.3重組表達質粒PCDNA3.1PDGFGAL的構建.........................................

19、................................232.4NEURO2A細胞的常規(guī)培養(yǎng)......................................................................................................252.5細胞生長曲線的繪制（MTT法）...............................................

20、............................................262.6PCDNA3.1PDGFGAL瞬時轉染NEURO2A(LIPFECTAMIM2000轉染試劑)...................262.7建立穩(wěn)定轉染小鼠PDGFGAL的NEURO2A細胞系：........................................................272.8細胞轉錄水平的鑒定（包括

21、瞬時轉染后和穩(wěn)轉單克隆細胞）...........................................282.9轉染后GAL蛋白水平的測定..................................................................................................312.10內源性過表達GAL對NEURO2A細胞的增殖分析.................

22、............................................362.11內源性過表達GAL對NEURO2A細胞周期的分析.............................................................362.12統(tǒng)計學處理..........................................................................

23、....................................................37結果..............................................................................................................................................381重組質粒PMDTPDGFGAL的鑒定.

24、..........................................................................................382重組表達質粒PCDNAPDGFGAL的鑒定.................................................................................383NEURO2A細胞生長曲線的繪制......

25、............................................................................................394脂質體法轉染后GAL轉錄水平的鑒定.......................................................................................404.1瞬時轉染后不同時間段GAL轉錄水

26、平測定...........................................................................404.2穩(wěn)轉后不同細胞克隆中轉錄水平的鑒定................................................................................415脂質體法轉染后GAL蛋白表達水平的鑒定..................

27、.............................................................425.1瞬時轉染后不同時間GAL表達水平......................................................................................425.2細胞克隆中GAL表達水平的鑒定................................

28、..........................................................436內源性過表達GAL對NEURO2A細胞的增殖分析...................................................................437內源性過表達GAL對NEURO2A細胞周期分析..........................................

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