CBX8在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及對SMMC-7721細(xì)胞增殖、侵襲能力和細(xì)胞周期的影響.pdf

1、目的：通過檢測CBX8 mRNA和蛋白質(zhì)在肝細(xì)胞肝癌組織中的表達(dá)及對肝癌細(xì)胞系SMMC-7721增殖、侵襲能力和細(xì)胞周期的影響，初步探討CBX8在肝細(xì)胞肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其意義。
　　方法：釆用實時熒光定量PCR和western blot分別檢測15對新鮮肝細(xì)胞肝癌手術(shù)標(biāo)本及癌旁組織中CBX8 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)；釆用組織芯片技術(shù)及免疫組織化學(xué)方法檢測CBX8蛋白質(zhì)在120例肝細(xì)胞肝癌手術(shù)標(biāo)本及癌旁組織中的表達(dá)情況；分析

2、CBX8的表達(dá)與肝癌發(fā)生及臨床病理特征之間的關(guān)系。分別在肝癌細(xì)胞系SMMC-7721中瞬時轉(zhuǎn)染小干擾RNA和過表達(dá)質(zhì)粒，通過MTT、平板克隆形成實驗及transwell小室檢測CBX8的敲降和過表達(dá)對肝癌細(xì)胞系SMMC-7721細(xì)胞增殖及侵襲能力的影響，通過細(xì)胞同步化及流式細(xì)胞儀檢測 CBX8對肝癌細(xì)胞系SMMC-7721細(xì)胞周期的影響。
　　結(jié)果：實時熒光定量PCR結(jié)果顯示CBX8 mRNA在13例（13/15）新鮮肝細(xì)胞肝癌手

3、術(shù)標(biāo)本中表達(dá)量增高，15例肝細(xì)胞肝癌與癌旁組織中的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.742，P＜0.05)。Western blot結(jié)果表明CBX8蛋白質(zhì)在11例（11/15）新鮮肝細(xì)胞肝癌組織中表達(dá)量增高，15例肝細(xì)胞肝癌與癌旁組織中的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.686，P＜0.05)。組織芯片及免疫組化檢測結(jié)果顯示CBX8在100例（83.33%）肝細(xì)胞肝癌手術(shù)標(biāo)本中表達(dá)，在46例（38.33%）癌旁組織中表達(dá)，CBX8在120例肝細(xì)胞肝

4、癌及癌旁組織的表達(dá)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=-8.072，P＜0.05)。CBX8在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)水平與患者乙肝表面抗原（HBsAg）、腫物直徑、被膜侵犯以及TNM分期有關(guān)（χ2=10.900、4.043、46.570、8.374，P＜0.05）。敲降 CBX8后，肝癌細(xì)胞系 SMMC-7721細(xì)胞的增殖、克隆形成率和遷移侵襲能力均下降，且與對照組相比差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=9.395、24.300、71.180、8.745、63.

5、700、9.044，P＜0.05)；過表達(dá) CBX8則結(jié)果相反，并且與對照組相比差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=7.177、36.100、24.680、9.045、7.037、6.525，P＜0.05)。通過檢測細(xì)胞周期，我們發(fā)現(xiàn)敲降CBX8后，實驗組G1期細(xì)胞所占比例明顯增加，S期細(xì)胞所占比例減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=3.170、3.269, P＜0.05）；過表達(dá)CBX8后，實驗組G1期細(xì)胞所占比例明顯減少，S期細(xì)胞所占比例增加，差異有