墨蘭與炭疽菌互作的抗病生理及抗菌肽抑菌作用研究.pdf

1、本文對(duì)廣東地區(qū)墨蘭炭疽病的發(fā)病情況進(jìn)行了調(diào)查,并從墨蘭病葉上分離出炭疽菌對(duì)其鑒定了種和生物學(xué)特性研究.通過人工接種炭疽菌于墨蘭葉片,研究了炭疽菌對(duì)墨蘭的侵染過程以及炭疽病發(fā)病過程與POD、SOD、PAL、幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶5種酶活性的關(guān)系.用水楊酸和茉莉酸甲酯處理墨蘭葉片,研究了2種誘導(dǎo)物對(duì)墨蘭抗炭疽病和POD動(dòng)態(tài)變化的作用,并用春雷霉素和武夷菌素2種抗生素類藥劑對(duì)墨蘭炭疽病進(jìn)行了防治作用研究.最后,研究了抗菌肽基因產(chǎn)物對(duì)炭

2、疽菌的抑制作用,以及根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的雙價(jià)抗菌肽BD基因轉(zhuǎn)化墨蘭.得到如下結(jié)果:1.降雨和粗放管理是墨蘭炭疽病發(fā)病嚴(yán)重的主要原因.3~5月炭疽病發(fā)病率上升最快,后期緩慢,而病情指數(shù)到8月達(dá)到最大.分析認(rèn)為廣東地區(qū)3~4月份的連日陰雨有利于墨蘭炭疽病的流行.2.經(jīng)真菌學(xué)家鑒定,引起廣東地區(qū)墨蘭炭疽病的病原菌是膠孢炭疽菌.該菌對(duì)溫度敏感,適溫為20℃~30℃,12℃以下和38℃以上菌絲不生長(zhǎng).炭疽菌對(duì)pH不敏感.培養(yǎng)基、碳源和光照影響炭疽菌孢

3、子萌發(fā).3.墨蘭葉片POD、SOD、PAL、幾丁質(zhì)酶和β-1,3葡聚糖酶5種酶活性的動(dòng)態(tài)變化與其各自的催化作用密切相關(guān).PAL活性于墨蘭葉片接種炭疽菌后36h開始上升,84h時(shí)達(dá)到最高;POD在接種后第12h和60h出現(xiàn)2個(gè)活性高峰,且第1峰值高于第2峰;SOD在接種后12h達(dá)到最高,之后下降.幾丁質(zhì)酶和β-1,3-葡聚糖酶在未接種炭疽菌前,活性很低,接種后升高,84h后達(dá)到最大.4.通過外施SA和MeJA可以誘導(dǎo)墨蘭增強(qiáng)對(duì)炭疽病的抗病

4、性.表現(xiàn)為墨蘭炭疽病顯癥時(shí)間推遲,病斑數(shù)少,病斑擴(kuò)展慢,病情指數(shù)降低.SA處理的葉片,POD的2個(gè)活性峰高過對(duì)照,MeJA處理的葉片僅在第60h的活性峰高于對(duì)照,表明SA和MeJA在誘導(dǎo)墨蘭抗炭疽病作用中可能有所不同.春雷霉素和武夷菌素對(duì)墨蘭炭疽病有較好的防治效果,其中,春雷霉素的防效好過武夷菌素.5.經(jīng)誘導(dǎo)抗菌肽基因在大腸桿菌和畢赤酵母中表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物對(duì)墨蘭炭疽菌有較強(qiáng)的抑制作用.抗菌肽處理后的培養(yǎng)基周圍炭疽菌生長(zhǎng)慢,菌絲短,稀疏,菌