柑橘膠孢炭疽菌的侵染過程及主要生理生化變化研究.pdf

1、炭疽病是柑橘采后貯藏期的主要病害之一，其病原真菌具有潛伏侵染性，因此在柑橘采后尤其是貯藏后期發(fā)病嚴(yán)重。目前關(guān)于炭疽病病原真菌的生物學(xué)特性、發(fā)生規(guī)律及采后化學(xué)防治研究較多，但對炭疽病致病因子及膠孢炭疽菌與柑橘的互作機(jī)制研究尚不深入。試驗(yàn)研究了膠孢炭疽菌孢子萌發(fā)的影響因素、侵染過程中侵染結(jié)構(gòu)的形成、膠孢炭疽菌侵染過程中細(xì)胞壁降解酶的動態(tài)變化；定量測定致病菌侵染柑橘引起細(xì)胞壁、活性氧清除酶系統(tǒng)、防御酶系統(tǒng)、酚類物質(zhì)的變化，從而探究柑橘的抗病機(jī)

2、制；選用八種綠色安全物質(zhì)進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，為柑橘采后保鮮提供新思路。主要研究結(jié)果如下：
　　1、A：體外探究膠孢炭疽菌孢子萌發(fā)的影響因素。膠孢炭疽菌在營養(yǎng)匱乏的培養(yǎng)基上依然萌發(fā)，說明該菌的分生孢子具有較強(qiáng)的萌發(fā)力；膠孢炭疽菌的酸堿耐受力較好，偏酸環(huán)境(pH=5~7)更適于孢子萌發(fā)；溫度是影響孢子萌發(fā)的重要因素，光照條件對孢子萌發(fā)影響不大。B：對柑橘進(jìn)行針刺和無傷接種，顯微觀察膠孢炭疽菌在果實(shí)上的侵染過程。觀察發(fā)現(xiàn)膠孢炭疽菌可以通過三種

3、方式侵染寄主，包括傷口、氣孔和直接侵入；直接侵入過程為孢子萌發(fā)形成芽管，芽管頂部形成附著胞，附著胞黑化，產(chǎn)生的侵染釘穿透角質(zhì)層，侵入寄主；分布于傷口周圍的膠孢炭疽菌生長速率要快于無傷接種的炭疽菌，傷口處細(xì)胞破裂為病原真菌提供了營養(yǎng)物質(zhì)。C：根據(jù)膠孢炭疽菌侵染過程中細(xì)胞壁降解酶活性的動態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)多聚半乳糖醛酸酶活性最高，纖維素酶活性高峰出現(xiàn)最早，表明多聚半乳糖醛酸酶和纖維素酶是主要的致病因子。
　　2、膠孢炭疽菌與柑橘互作過程中，

4、過氧化物酶與過氧化氫酶活性隨著病原真菌的侵入大幅升高，以減少自由基對細(xì)胞膜系統(tǒng)的傷害，在防御炭疽菌侵染過程中起到一定作用。苯丙氨酸解氨酶在接種第二天后維持在較高水平，說明與抗病相關(guān)的植物次生代謝產(chǎn)物在接菌第二天開始大量合成。根據(jù)丙二醛含量的變化，可以得出即使活性氧清除酶的活性在增強(qiáng)，也未能阻止柑橘組織的質(zhì)膜過氧化。細(xì)胞壁中的纖維素與果膠在果實(shí)防御中起到一定作用，其中纖維素的防御要早于果膠。木質(zhì)素含量在整個互作過程中一直呈上升趨勢，說明木

5、質(zhì)素的防御作用更為持久。在寄主防御過程中，酚類物質(zhì)中蕓香柚皮苷、香風(fēng)草苷、橙皮素、甜橙黃酮、對羥基苯甲酸起到一定的防御功能。
　　3、綜合比較四種食品添加劑和四種柑橘果皮成分對膠孢炭疽菌的抑制作用，藥效最明顯的是橙皮素，其次是對羥基苯甲酸。其中 D-檸檬烯、橙皮素、對羥基苯甲酸、原兒茶酸的EC50分別為20、0.076、0.07、0.187 mg/mL；肉桂酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、山梨酸鉀的EC50分別為4.515、5.321、8