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文檔簡介
1、Y773403分類譬霄級單位代碼:10019學號:B02066‘專峨巖嚏夭等博士學位論文生姜原生質體培養(yǎng)與體細胞變異ProtoplastCultureandSomaticVariationofGinger(ZingiberofficinaleRosc)(國家科技攻關資助項日60|1002)(農業(yè)部農業(yè)結構調整項目040602B)研究生:酆甚垡指導教師:一毯拯豎熬援中請學位門類級別:盛堂埴專業(yè)名稱:蘊苤堂研冤方向:益苤生理生盆工生塑堂所存
2、學院:丞堂生生物整盔堂逮二零零五年五月中國農業(yè)大學博士論文摘受AbstractGinger(Zingiberofficma缸Rose)isacultivarproducingrhizomesofthefamilyZingiberaceaeItismostlydistributedintheAsiantropicalandsubtropicsregionAndSouthAfrica,NorthAmericaandAustraliaalso
3、plantgingersGingersarerichinvolatileoilsandwidelyusedasacondiments,dyes,beverage,medicineandvegetableGingersannuallypropagatethemselvesbyrhizomeswithlowproliferationrateTheyareheavilyattackedbysoilboropathogensAndthequal
4、ityofrhizomesdegeneratesforthelongtermagamicpropagationGingersseldomflowersandhaveseeds,soitisdifficulttocultivatenewvarietythroughcrossbreedingInthispaperinvitrotissueculturetechniqueswerecarriedoutincludingsomaticandem
5、byogeniccallusinductionembryogenicsusppeosioncultureandprotoplastculture1Somaticembryogcniccalliof4gingergenotypeswereproducedSomaticembryogeniccalluswasinducedfromgingershoottipsonMSmediumsupplementedwith10mg/L2,4Dand02
6、mgU1KTThecallus(about1Scmindiameter)weretransformedintotheMS02mg‘L‘24一D50mgL1BA3%socrose07%ag礬andshootsandrootswereformedAndshootsdevelopedintocompleteplantletswithrhizomesonsolidMSmediumsupplementedwith30ragL1BAand01mgo
7、L1NAAand6%sucroseTheeffectofphytohormonesonembryogeniccallusformationandredifferenciationwasdiscussedTheeffectofsucroseonrhizomeformationwasresearched2Somaticembryogenicsuspensionculmresof4gingergenotypcswere:established
8、Fromwhich,regeneratedplantletswereobtainedTherelationshipbetweenthedryweightfDw)ofsuspensionculturesandpHchangesinmediumwasalsodiscussedTheeffectsofinoculationandAgN03Oilthegrowthofembryogenlcsuspensionswerealsodiscussed
9、TheoptimumconcentrationofinoculationandlevelofAgN03were10%and60mgL~respectively3Protoplastswereisolatedfromembryogenicsuspensionsincubatinginenzymesolutioncontaining40%celluloseOnozukaR10,10%maceroymeR10,01%PectolyaseY23
10、,05%CaCl2,01%IVIESand11%mannit01Theenzymemixturewerekeptinastationarypositionfor6handshaken(60rpm)for6hat27℃Theyieldandviabilitywere627X1069—and907%respectivelyPurifyingprotoplastswereculturedinitiallyinshallowliquidlaye
11、rs4Thechromosomenumbersofembryogeniccallusderivedplants,embyogenicsuspension—derivedplantsandprotoplastderivedplantsWere22,equaltotheirparentplantsTherewemdifferencesofmorphologicalcharactersbetweeninvitroplantsandpsxcnt
12、plantssuch鵲leafthick,leafcolorandLeafindexTheRAPDanalysisofregeneratedplantsindicatedrelativelysomaticvariationThechromosomenumberdeterminationandRAPDanalysisofembyogeniccallusandembryoenicsuspensionderivedandprotoplastd
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