水稻缺鐵上調(diào)基因中與膜泡運(yùn)輸相關(guān)基因Sec27p、ARHI的克隆、亞細(xì)胞定位與功能分析.pdf_第1頁
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1、本論文針對(duì)我實(shí)驗(yàn)室前期的基因芯片的研究結(jié)果,對(duì)水稻缺鐵脅迫下相對(duì)表達(dá)量最高——與膜泡運(yùn)輸相關(guān)的一組基因進(jìn)行了分析。通過水稻根尖細(xì)胞超薄切片的透射電鏡觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)膜附近有突起的小泡,且缺鐵處理水稻根尖細(xì)胞的小泡比加鐵處理的小泡大,內(nèi)含物更多,同時(shí)-Fe處理水稻根尖細(xì)胞的小泡呈現(xiàn)向胞內(nèi)、胞外兩個(gè)方向發(fā)生,+Fe處理的樣品僅見向胞外發(fā)生的小泡。實(shí)驗(yàn)還對(duì)水稻缺鐵脅迫下上調(diào)表達(dá)基因中與膜泡運(yùn)輸?shù)认嚓P(guān)的16個(gè)基因進(jìn)行比對(duì)、分析,對(duì)其中的ARHI

2、、Sec27p、Tuftelin-interacting、pV72四個(gè)基因缺鐵脅迫下上調(diào)表達(dá)進(jìn)行了進(jìn)一步的鑒定,并通過侵染洋蔥表皮細(xì)胞觀察Sec27p-GFP、ARHI-GFP融合蛋白的瞬時(shí)表達(dá),對(duì)目的基因進(jìn)行了亞細(xì)胞定位,結(jié)果表明Sec27p蛋白定位于細(xì)胞質(zhì)中靠近細(xì)胞質(zhì)膜附近的小泡上;ARHI蛋白位于細(xì)胞核及核周邊膜狀結(jié)構(gòu)上。另外,利用Sec27p、ARHI的轉(zhuǎn)基因煙草,結(jié)合NCBI序列比對(duì)及蛋白質(zhì)分析軟件的結(jié)果,對(duì)Sec27p、AR

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