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1、UDC577編號學(xué)號三!QQ墨Q絲論文題目研究生:王欣指導(dǎo)教師:主匿蟹教援專業(yè):生物化堂皇盆王生物堂研究方向:擅物僉王生物堂皇籃曼整昱所在學(xué)院:生盒抖堂堂陵2013年5月17日內(nèi)蒙古人學(xué)碩士學(xué)位論文擬南芥高親和性K轉(zhuǎn)運體月蝴基因表達調(diào)控和功能研究摘要彳刪舾基因編碼擬南芥高親和性鉀轉(zhuǎn)運體,低K條件下,在根中表達,負責(zé)根細胞從土壤中吸收鉀,是植物適應(yīng)低鉀環(huán)境的重要基因。本研究有兩個內(nèi)容:(1)鑒定彳刪胎啟動子中感應(yīng)低鉀信號的順式元件的位置,
2、為下一步利用酵母單雜交方法鑒定調(diào)節(jié)彳刪舾基因表達的轉(zhuǎn)錄因子奠定基礎(chǔ)。本實驗將彳刪舾六個不同長度的啟動子克隆到雙元表達載體p0RER1中B一葡萄糖醛酸酶(∞∽報告基因的上游,形成緲伽D芒盯彳刪舾伽融合基因。通過農(nóng)桿菌侵染野生型擬南芥的花序,多代篩選,得到穩(wěn)定表達該融合基因的T3代轉(zhuǎn)基因種子。通過基于B一葡萄糖醛酸酶活性的組織化學(xué)染色法,對這些來自T3代轉(zhuǎn)基因種子的幼苗進行了分析,確定彳芒刪舾啟動子中感應(yīng)低鉀環(huán)境的順式作用元件位于起始轉(zhuǎn)錄上
3、游一267到一471堿基的范圍內(nèi)。(2)探索在低鉀條件下,其它土壤逆境對彳刪府基因表達的調(diào)節(jié),以及AtHAK5在植物適應(yīng)其他土壤逆境中的功能。以穩(wěn)定表達全長彳刪腸啟動子和筋報告基因的擬南芥T3代轉(zhuǎn)基因種子為材料,結(jié)合realtimeRTPCR,本研究發(fā)現(xiàn),彳刪舾基因不但受低鉀條件,同時也受H。0。、ABA、NaCl和低鈣環(huán)境誘導(dǎo)表達,并且這些逆境對彳f倒舾基因表達的誘導(dǎo)作用被NHl所抑制。為了探索AtHAK5是否參與植物適應(yīng)如上逆境的信
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