24837.重組人二型血紅素加氧酶的表達、純化及性質鑒定_第1頁
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文檔簡介

1、目錄摘要一2Abstract3常用縮寫4文獻綜述血紅素及其代謝5CO：血紅素分解代謝的主要標志“7膽紅素lXa：抗氧化鏈的一員“JJI6IQI7血紅素氧化酶(heineoxygenase，HO)一8血紅素氧化酶缺乏癥10血紅素氧化酶的可能功能11正文材料與方法13結果與討論HisIoHMOX2質粒的構建‘30Hisl0HMOX2的表達與純化30Hisl0HMOX2的酶活測定35討論39參考文獻40附錄50致謝AbstractInorde

2、rtocharacterizehumanheineoxygenase一2，weoverexpressedbiosyntheticHomosapienshemeoxygenase2(HMOX2)fromEscherichiacoliintheT7expressionsystemasapoly—HistaggedfusionconstructTheexpressedrecombinantHisl0HMOX2(354kDa)WaSfirstp

3、urifiedbyNiNTAaffinitychromatography，thenpurifiedbyanionexchangechromatographyTheHisl0HMOX2’Stypicalyieldwas92mgfrom1literofculturemediumwithpurityabove90％TherecombinantHMOX2wasaSsayedforoxygenaseactivity，showingoxygenas

4、eactivityof6951U／mgTheoxygenaseactivityassayalsoshowedthatthepurifiedrecombinantHMOX2toleratedbroadrangesofpH(pH69)andtemperature(2095。C)TheoptimumtemperatureandpHis400CandpH8TheHMOX2’SH152A＆K89Emutantsshowedalmostnooxyg

5、enaseactivity，whichmaybethereasonofpulmonaryhaemosidemsisandsensRivetohyperoxiainducedtissueinjuryOurresearchmayfacilitatefurtherstudiesofHMOX2structureandfunctionincludingthedeterminationofi協crystalstructurebyXraydiffra

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