25055.部分野生百合(lilium.)的核型和issr分析

1、西南大學碩士學位論文部分野生百合（Lilium.）的核型和ISSR分析姓名：劉華敏申請學位級別：碩士專業(yè)：花卉學指導教師：李名揚20100501西南大學碩十畢業(yè)論文第1、6、8對上的居I、日J隨體的山丹；具有2對位于長臂上的隨體的青島百合。所研究的野生百合，在湖北百合中發(fā)現(xiàn)有三種數(shù)目B染色體，分別為1、2、6條端部B染色體，宜昌百合有一條近中部B染色體。3、核型進化根據(jù)LevitzkyStebbins對有花植物核型進化中的對稱原始，不對

2、稱進化的觀點，將14種百合按核型不對稱系數(shù)由高到底排為：淡黃花百合卷丹麝香百合瀘定百合大理百合岷江百合野百合南川百合湖北百合川百合山丹宜昌百合青島百合蘭州百合。即進化程度由高到低淡黃花百合卷丹麝香百合瀘定百合大理百合岷江百合野百合南川百合湖北百合川百合山丹宜昌百合青島百合蘭州百合。4、聚類分析與種間親緣關系根據(jù)聚類結果將14種百合分為3大類：第一類：卷丹；第二類：湖北百合；第三類：青島百合、山丹；第四類：蘭州百合、岷江百合、大理百合、蛋

3、黃花百合、麝香百合、野百合、瀘定百合、宜昌百合、川百合、南川百合。5、本研究中發(fā)現(xiàn)用改良CTAB法，029新鮮葉片，提取液中加入2％的PVP和2％的B巰基乙醇能得到濃度、純度較高的DNA，適于百合ISSR分析。6、經(jīng)過對PCR體系中的DNA、引物、M孑、Taq4因素進行3水平的正交試驗，挑出條帶最多最清晰的組合，再在它的基礎上進行單因素的調整，最后得出最佳的PCR反應體系為：10xPCRbuffer緩沖液25ul、25ram／1dNTP

4、20ul、25mM／L的鎂離子15ul、5um／L的引物10ul，模板DNA1020ng(03u1)、taq酶03ul(15U)、174ul的雙蒸水。經(jīng)過反復試驗，反應程序優(yōu)化為：94℃5min，94℃45s，適宜退火溫度45s，72℃75s，40個循環(huán)，72℃8min，25℃。7、通過挑選出的6條引物，擴增出180條多態(tài)性帶，進行聚類分析，發(fā)現(xiàn)分析的20個樣百合可以分為以下5大類：第一類：瀘定百合、未鑒定百合、宜昌百合、未鑒定4、川百

5、合、岷江百合、蘭州百合；第二類：卷丹、未鑒定3；第三類：青島百合、淡黃花百合、麝香百合、野百合、大理百合、未鑒定2、湖北百合；第四類：山丹；第五類：毛百合、未鑒定1。8、核型聚類將14種百合聚為4大類，ISSR聚類將20種百合聚為5大類。兩種分析方法得到的聚類結果非常相似，形態(tài)分類中百合組的大部分百合聚為一組，而卷瓣組相對分散。核型聚類中無鐘花組百合，而在ISSR聚類中，鐘花組的毛百合單獨聚為一類。核型聚類中輪葉組的青島百合較早被分離出