納米膠體金層析法快速檢測(cè)農(nóng)藥克百威殘留.pdf

1、本試驗(yàn)以人工合成的克百威免疫原免疫BALB/C F1小鼠，分析納米膠體金層析快速檢測(cè)克百威殘留量。首先用化學(xué)交聯(lián)的方式合成了兩種人工抗原BFNH-BSA、BFNH-OVA，化學(xué)交聯(lián)產(chǎn)物用紫外掃描和蛋白電泳進(jìn)行分析鑒定。用合成的人工免疫原BFNH-BSA免疫BALB/C F1小鼠，在第四次免疫后第八天取血制備抗血清，用BFNH-OVA包被酶標(biāo)板，間接ELISA檢測(cè)結(jié)果表明:氨基甲酸酯類殺蟲劑的交叉競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)作用明顯。用50％PEG

2、將小鼠的脾細(xì)胞與SP2/0瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，以12塊96孔酶標(biāo)板接種融合細(xì)胞，減少了克隆次數(shù)，縮短了試驗(yàn)進(jìn)程。用有限稀釋克隆技術(shù)，以間接ELISA法和間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法，經(jīng)過2-4次的克隆和篩選，最終共篩選得到5株能穩(wěn)定分泌目的抗體的雜交瘤細(xì)胞株。用培養(yǎng)擴(kuò)增后的各建株細(xì)胞誘導(dǎo)小鼠生長(zhǎng)腹水，腹水效價(jià)達(dá)10-6-10-7。試驗(yàn)中首次嘗試了使用納米金顆粒替代酶標(biāo)記農(nóng)藥抗體，用40納米的膠體金成功標(biāo)記了抗克百威的單克隆抗體，初步建立了膠體金定