db34t 2254-2014 水產(chǎn)品中氯霉素殘留的檢測-膠體金免疫層析法

1、ICS67.050B50DB34安徽省地方標準DB34T2254—2014水產(chǎn)品中氯霉素殘留的檢測—膠體金免疫層析法DetectionofchlamphenicolresidueinaquaticproductsColloidalgoldimmunochromatographicmethod文稿版次選擇20141217發(fā)布20150117實施安徽省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB34T2254—20141水產(chǎn)品中氯霉素殘留的檢測膠體金免疫層析法1

2、范圍本標準規(guī)定了水產(chǎn)品中氯霉素（Chlamphenicol，CAP）殘留的檢測——膠體金免疫層析法的原理、試劑和材料、儀器和設(shè)備、測定步驟、結(jié)果判斷及表述、結(jié)果確證的方法。本標準適用于魚、甲魚、龜肌肉組織和蝦、蟹去殼、腸腺的可食用組織中氯霉素殘留的快速篩查檢測。本方法的檢出限為0.3μgkg。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括

3、所有的修改單）適用于本文件。GBT6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3原理本法為競爭抑制法，將氯金酸用還原法制成一定直徑的金溶膠顆粒，標記抗體。樣品中殘留的氯霉素，經(jīng)乙酸乙酯提取，正己烷凈化，滴加在氯霉素免疫膠體金快速檢測試劑板的加樣孔中，樣品溶液以硝酸纖維素（NC）膜為載體，利用微孔膜的毛細管作用緩慢向另一端滲移，在移動過程中，樣品溶液中的氯霉素與膠體金標記的特異性單克隆抗體結(jié)合，從而抑制了抗體和檢測線上特異性結(jié)合抗原的結(jié)合，未被氯

4、霉素結(jié)合的抗體與檢測線上的抗原反應(yīng)，并通過膠體金的顏色而顯示紅色條帶。用膠體金讀卡儀或目測比較板卡上控制線（C線）和檢測線（T線）上紅色條帶的有無及顏色的相對深淺進行判定。當試樣中的氯霉素含量達到或超過本方法檢出限時，檢測線較控制線顯色淡甚至無顯色，判定為陽性；反之，當試樣中的氯霉素含量在本方法檢出限以下或無殘留時，檢測線與控制線顯色一致或偏深，判定為陰性。4試劑和材料4.1特殊注明外，本法所用試劑均為分析純，水為符合GBT6682規(guī)定

5、的二級水。4.2乙酸乙酯（C4H8O2）。4.3正己烷（C6H14）。4.4氯霉素免疫膠體金快速檢測試劑板4.4.1氯霉素結(jié)合抗原：偶聯(lián)率為1∶10～1∶20（載體蛋白：CAP）。4.4.2抗氯霉素抗體：多抗或單抗。多抗效價應(yīng)大于5000（間接ELISA法），或有效抗體含量應(yīng)大于0.05mgmL；特異性應(yīng)大于5000（間接抑制ELISA法）。單抗效價應(yīng)大于15000（間接ELISA法），或有效抗體含量應(yīng)大于0.5mgmL；特異性應(yīng)大于5