褐牙鲆白化相關(guān)基因的研究.pdf

1、褐牙鲆是中國(guó)北方重要的海水養(yǎng)殖魚類,養(yǎng)殖規(guī)模較大.在養(yǎng)殖過(guò)程中常出現(xiàn)高比例的白化現(xiàn)象,白化褐牙鲆商品價(jià)值大大降低.許多學(xué)者采用餌料強(qiáng)化等方法降低褐牙鲆白化率,取得一定成效.但有關(guān)褐牙鲆白化相關(guān)基因的研究國(guó)內(nèi)外未見報(bào)道.該研究采用mRNA差異顯示方法分離褐牙鲆白化相關(guān)基因.以正常和白化牙鲆表皮組織總RNA為模板,用Oligo d(T)13M(M分別為A、C、G)3種錨定引物和26種差異顯示隨機(jī)引物組合進(jìn)行差異顯示,PAGE凝膠電泳后,用新

2、型高靈敏度核酸熒光染料SYBR GREEN Ⅰ顯示差異DNA條帶,得到區(qū)分度較好的差異表達(dá)圖譜,共分離49條牙鲆白化相關(guān)DNA片段,片段長(zhǎng)度260~920 bp左右.對(duì)其中10條差異片段進(jìn)行克隆測(cè)序,測(cè)序結(jié)果通過(guò)Internet與NCBI序列數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行同源性比較.結(jié)果發(fā)現(xiàn)2個(gè)片段與已知基因有較高的同源性,其余片段與已知基因無(wú)明顯的同源性.Alb1核酸序列片段與斑馬魚類鋅指蛋白216基因有較高同源性,其部分序列同源性達(dá)84﹪;用BLAST