29408.魚類il1β和il1r1like基因的分子克隆和鑒定_第1頁
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1、浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院碩士學(xué)位論文魚類IL1β和IL1R1like基因的分子克隆和鑒定姓名：王浩申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：細胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：邵健忠20091215浙江人學(xué)頒|j學(xué)位論文摘要AbstractInterleukin1playsanimportantroleinthelocalandsystemicinflammatoryresponse，includingIL—letandIL113(namedasIL一1F1andIL一1F

2、2，respectively)Atpresent，theInterleukin1familyarisedinvertebratesconsistsof11knowngenesencodingligands(IL1F1toIL一1F11)Buttodate，noorthologuetoIL一1pisfoundinfishorotherlowvertebratesIL1functionsbybindingtheirreceptors，IL一

3、1ReceptortomediatesignaltransductiontorealizetheirbiologicaleffectsIL1ReceptorfamilycontainstypeIreceptors(IL一1RI)，typeIIreceptors(IL一1R2)，andtheIL一1receptoraccessoryprotein(IL一1RAP)Inthisstudywedevelopedbioinformaticsme

4、thodsbasedongenomicdatabases，successfullyclonedIL113geneandIL1R—likegeneinTetraodon，andobtainedrecombinantTNIL一113proteinandrabbitantiIL113serumTNIL一1BcDNAcontains4exons，3intronsanda774bpopenreadingframe(ORF)Thepeptidede

5、ducedfromORFis257aainsizeTNlL一1Bpromotercomprisesseveraltranscriptionbindingsites，suchasTATAbox，NF—KB，CEBPAPI，CCAATandSOon，3’UTRcontains5ATTTAinstabilitymoti￡ArecombinedplasmidTNIL113—pET41awasobtainedbysubcloningtheORFo

6、fTNIL一1DintoprokaryoticexpressionplasmidpET41aandsequencedTarget601KdproteinwasexpressedafterIPTGinduceandpurifiedbyNiNTATNIL1Rlikegenecontains11exons，anda1902bpORFcoding633aa，whichhas3IgDomain，1transmembranedomain(TMD)，

7、and1TIRDomainAlltheresultslayfoundationinfunctionstudiesoffishIL一1BandIL一1R，andisimportantforfishimmunesystemresearchandevolutionofimmunologygenesKeywords：Fish，Tetraodon，IL一113，IL1R1like，genecloning，prokaryoticexpression

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