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1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文BpERF1和CabZIP的遺傳轉(zhuǎn)化及BpERF1功能的初步分析姓名:肖于華申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:何水林20090401福建農(nóng)林大學(xué)2009屆碩士學(xué)位論文關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)錄因子,防御反應(yīng),APE/ZRFbZIP,負調(diào)節(jié)子AbstractTranscriptionfactorsplayimportantrolesinplantsdefenseastheycallactivatetheexp
2、ressionofrelativedefensegenesthroughbindingtothecisactingelementslocateatthepromoterregionofthemIsolationandthesubsequentlyfunctionalstudyoftranscriptionfactorsisamajorapproachintheresearchofplantsdefensemechanismInthisp
3、aperaBpERF(ethyleneresponsiveelementbindingfactors,ERF)and3CabZIPs(basicleucinezipper,bZIP)transcriptionfactorswhichmayinvolvedinthestressresistancewereisolatedfromeDNAlibraryofChinesecabbage(Brassicarapasubsppekinensis)
4、andpepper(CapsicumannuumL)respectivelyTheoverexpressionvectorsofallthefourgeneswereconstructedandtransformedintotobaccobyAgrobacteriumtumefaciemsmediatedmethodTherolesofBpERF1inplantsdefensewasfurtherstudiedusingthetrans
5、genictobaccoplantsThemainresultisasfollows1AputativememberofAP2/ERFtranscriptionfamilywasisolatedfromtheeDNAlibraryofChinesecabbageleaveschallengedwithhightemperatureTheputativeaminoacidsequenceanalysisshowedthatitbelong
6、stotheERFsubfamilyoftheAP2genefamilyThepredictedthreedimensionstructureoftheputativeproteinwasconsistentwiththestructureofAP2domainofArabidopsisthalianaAtERF1informerstudyWhat7more,thetransientexpressionresultshowedthatt
7、heBpERF1bindspecificallywiththeGCCboxbutnottheDREboxThus,weassigneditBpERFlTheopenreadingframeoftheBpE艘1wasemployedtoconstructtheplantsoverexpressionvectorbytheGatewaysitespecificrecombinationtechnologyThevectorwastransf
8、ormedintotobaccosubsequentlybyAgrobacteriumtumefaciemsmediatedmethod,andtheTOtransgeniclinewasacqukedTheplantsofT1transgenictobaccolinesderivedfromtheselfcrossofTOtransgenictobaccowereusedforfBrtherfunctionalanalysisLots
9、ofT1transgenicplantsshowedaloseofapicaldominanceResultsoftheabioticstresstreatmentssuchasosmotic,drought,hightemperatureanddroughtshowednosignificantdiferencebetweentheT1transgenictobaccoofBpERFlandthewildtypeoneResultso
10、fpathogeninoculationexperimentshowedthatthetransgenicplantsoverexpressingBpERFlweremoresusceptibletoPseudomonasSyringaepvtomatoDC3000PhytophthoracapsiciLeonianandtobaccomosaicviruswhencomparedwiththewildtypeonesThus,itwa
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