豬繁殖與呼吸綜合征病毒地方分離株P(guān)RRSV-SCMS MN蛋白基因的克隆及序列分析.pdf

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬繁殖與呼吸綜合征病毒地方分離株P(guān)RRSVSCMSMN蛋白基因的克隆及序列分析姓名：袁孟偉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：郭萬柱20040501前言豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由PRRSV引起懷孕母豬發(fā)熱、厭食、早產(chǎn)、晚期流產(chǎn)、死胎、弱仔和木乃伊胎兒等繁殖障礙以及仔豬的呼吸系統(tǒng)癥狀和高死亡率的接觸性傳染病。1987年美國首先報道了該病的發(fā)生，隨后加拿大、德國、荷蘭等一些國家也先后暴發(fā)了該病。199

2、1年，荷蘭科學(xué)家Wensvoort在感染豬體內(nèi)分離到病原，命名為Lelystad病毒(n，)【l】，隨后德國和美國學(xué)者相繼從本國病豬體內(nèi)分離到相似的病毒。1988年，我國臺灣省從美國引進比利時種豬時帶入該病，隨后每年都有此病發(fā)生，并于1993年從患病豬群中分離到P融毽病毒。1995年，我國大陸動植物檢疫機關(guān)從加拿大引進的種豬中查出PRRSV抗體。1996年，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所首次從國內(nèi)疑似PRRS病豬中分離到PRRS病毒，從

3、而證實了本病在我國的存在[2】。由于該病引起發(fā)病國家養(yǎng)豬業(yè)的巨大損失，被OIE索引列為B類傳染病，我國也將此病列為二類傳染病。一病原學(xué)PRRSV屬動脈炎病毒科動脈炎病毒屬，是一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒，病毒粒子為球形，約45nm80nm，衣殼上有長約5nm的短突起，在病毒粒子中央部可觀察到擬核(核衣殼)，其直徑約為40衄【3】。蔗糖和氯化銫中浮密度分別為1149／era3和1199，cm3，PRRSV在低溫下能保持其穩(wěn)定的感染性，但

4、不耐熱(56“12)，不耐酸(pH5O)，不耐堿(pH8O)，由于有脂質(zhì)囊膜，用脂溶劑氯仿和乙醚處理后，PRRSV失去活性。PRRSv不凝集豬、綿羊、山羊、牛、鼠、兔、豚鼠、人類O型、鴨和雞的紅細胞【415】。根據(jù)基因組同源性的高低，將本病毒分北美洲株(A型)和歐洲株(B型)，其原形毒株分別為ATCCVR2332和LV。國內(nèi)大多數(shù)分離株在遺傳學(xué)上與歐洲株相差較大，與北美洲株比較接近。但趙耘等m】研究發(fā)現(xiàn)中國分離株B13株ORF7與LV和

5、VR2332的核苷酸同源性分別為992％、594％：N蛋白氨基酸同源性分別為984％、547％。表明B13株在基因型上可能與LV株同屬于歐洲亞群。PRRSV的生長要求較高，在常用的原代和傳代細胞中不能生長。目前只有在豬原代肺泡巨噬細胞(PAM)、CL2621細胞、MAl04系的克隆株MARC145細胞及從MARC145中克隆出的對PRRSV更敏感的HS2H細胞上生長良好，可用于PRRSV的分離與鑒定。據(jù)報道不同毒株適合生長在不同的細胞上