雞傳染性法氏囊病ELISA監(jiān)測方法的標準化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該課題對IBD免疫監(jiān)測的間接ELISA方法進行了標準化研究,并制備了相應的診斷試劑盒.在酶標抗體的制備方面,該研究對幾種提純IgG的方法（硫酸銨法、鹽酸-硫酸銨法、醋酸-硫酸銨法、辛酸-硫酸銨法和硫酸銨-辛酸法）作了比較.SDS-PAGE電泳和蛋白含量測定分析表明,辛酸-硫酸銨法和硫酸銨-辛酸法提取的IgG純度均較高,且硫酸銨-辛酸法提取的蛋白含量高于辛酸-硫酸銨法.采用改良過碘酸鈉法將提純的兔抗IBDV IgG和兔抗雞IgG進行辣根過

2、氧化物酶（HRP）標記,效果比較理想,二者工作濃度分別為1：1000,1：1200.該研究探討了MTT比色法用于檢測病科中IBDV在細胞培養(yǎng)物中增殖情況的應用.經(jīng)反復試驗,該研究確立了間接ELISA檢測IBD抗體的最佳反應條件.根據(jù)對32份SPF雞陰性血清檢測結(jié)果的平均值制定了間接ELISA判定標準.在此基礎上研制出IBD間接ELISA快速診斷試劑盒,并對盒內(nèi)各組分的性狀、保存、質(zhì)量控制以及診斷試劑盒的特異性、敏感性、可重復性、符合率、

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