棉花纖維特異表達(dá)基因LTP3和FbL2A啟動(dòng)子的克隆及其活性研究.pdf

1、棉纖維是由胚珠外珠被表皮細(xì)胞經(jīng)分化突起、伸長(zhǎng)和次生壁加厚而形成的,這些形成纖維的細(xì)胞受激素的誘導(dǎo),從開(kāi)花當(dāng)天開(kāi)始伸長(zhǎng),持續(xù)約50天后發(fā)育成熟.在纖維發(fā)育的不同時(shí)期中,有許多基因的表達(dá)呈現(xiàn)明顯的組織特異性和發(fā)育的階段性.雖然有些基因的確切功能還不太清楚,但根據(jù)這些基因表達(dá)的特征,弄清了不少在纖維發(fā)育的不同階段特異表達(dá)的啟動(dòng)子,為利用基因工程的方法定向改良棉花纖維品質(zhì)提供了很好的啟動(dòng)子元件.如在纖維發(fā)育早期特異表達(dá)的E6基因啟動(dòng)子,LTP基

2、因啟動(dòng)子,在纖維發(fā)育中后期特異表達(dá)的FbL2A基因啟動(dòng)子等.以彩棉的基因組為模板,利用PCR的方法,克隆了LTP3及FbL2A兩個(gè)基因的啟動(dòng)子,大小分別為1548bp和4050bp,還將LTP3啟動(dòng)子5'端缺失約900bp,得到614bp的LTP3啟動(dòng)子片段.分別命名為L(zhǎng)TP3(1)、LTP3(2)及FbL2A.經(jīng)測(cè)序分析,與GenBank中登錄的啟動(dòng)子序列同源性均為99％,僅有個(gè)別堿基發(fā)生改變,而啟動(dòng)子的基本元件未發(fā)生突變.取轉(zhuǎn)基因陽(yáng)