光敏核不育水稻基因pms1 BAC克隆微物理圖譜的構(gòu)建及相應(yīng)亞克隆的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、光敏核不育水稻是中國一種十分重要的種質(zhì)資源,它在長日條件下不育,短日條件下育性恢復(fù),因而既可以用作保持系繁殖種子,又可以用作不育系生產(chǎn)雜交種子,一系兩用,使得傳統(tǒng)的水稻雜交制種的"三系法"向"兩系法"的轉(zhuǎn)變成為可能.闡明光敏核不育水稻育性轉(zhuǎn)換的遺傳本質(zhì)是充分利用這一種質(zhì)資源的保障,也為進一步揭示其生理生化機理提供線索.主要研究結(jié)果簡述如下：1、根據(jù)BAC克隆21O9上目的基因區(qū)段酶譜及ORF分布情況選擇PstI、EcoRI和KpnI三種

2、限制性內(nèi)切酶將特定區(qū)段的基因組片段構(gòu)建到轉(zhuǎn)化載體pCAMBIA1301上,覆蓋了目的基因區(qū)段余下的30kb片段.至此,4B、7/5-32、10G（用TAC7載體構(gòu)建）和PSTI、ECORI、KPNI（用pCAMBIA1301載體構(gòu)建）六個亞克隆完全覆蓋了目的基因區(qū)域.2.利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法將相應(yīng)的6個亞克隆轉(zhuǎn)到隱性受體農(nóng)墾58S中,為基因功能互補試驗奠定了工作基礎(chǔ).3、2001年對4B轉(zhuǎn)化單株R<,1>代部分家系進行了基因功能驗證