水稻微切微克隆文庫的構(gòu)建及BAC克隆的染色體定位.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該文將染色體微切微克隆方法應(yīng)用于水稻基因組研究,結(jié)果如下:1、應(yīng)用顯微切割方法分離了水稻1號染色體,水稻4號染色體和水稻4號染色體端粒區(qū),經(jīng)連接接頭PCR(LA-PCR),使fg級DNA體外擴增到μg級,成功的構(gòu)建了水稻1號染色體,4號染色體和4號染色體端粒區(qū)特異性DNA文庫.2、對水稻4號染色體BAC克隆上公布序列設(shè)計套式PCR引物,經(jīng)實驗證明,該引物在水稻4號微切染色體中能擴增出分子量特異的單一條帶.3、以水稻4號染色體短臂RFLP

2、分子標(biāo)記FR2373公布序列設(shè)計特異性引物,采用PCR法對水稻4號染色體端粒區(qū)文庫中的500個陽性克隆進行篩選;以水稻1號染色體sd-1基因兩側(cè)RFLP分子標(biāo)記RG109和RZ161引物特異性擴增產(chǎn)物為探針,采用微陣列法對水稻1號染色體微切微克隆文庫中的240個克隆子進行篩選;未得到特異性克隆子.分析表明,由于篩選的克隆數(shù)目少和存在不定期的假陽性,從文庫中篩選特異性片段需要進一步擴大篩選克隆的數(shù)目.下一步我們將采用微降列法雜交法進行大規(guī)

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