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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文常用補(bǔ)益中藥和復(fù)方體外結(jié)奶牛吞噬細(xì)胞殺菌功能的影響姓名:母安雄申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:胡松華2000.5.1浙江大學(xué)碗士論文I常甬補(bǔ)益中藥和復(fù)方缽訃嗣奶牛吞噬細(xì)胞功能的影響摘要多形核白細(xì)胞(PMN)是奶牛體內(nèi)主要的吞噬細(xì)胞,在防御乳腺感染中起重要作用。采用適當(dāng)方法增強(qiáng)PMN的吞噬殺菌功能,對于提高乳腺的抗感染能力,減少乳腺發(fā)病具有重要意義。本文利用MTr法和NBT法分別測定奶牛Plan的殺菌功能和
2、超氧基釋放水平,探討常用補(bǔ)益中藥及復(fù)方體外對奶牛PMN功能的影響,為進(jìn)一步研究采用中草藥防治奶牛乳房炎提供基礎(chǔ)。/l1M兀法測定奶牛PMN殺菌功能將金黃色葡萄球菌與奶牛PiN體外培養(yǎng)一段時間\后,用皂素破壞PMN,加入啪vr孵育,未被PMN殺滅的細(xì)菌將MTT還原成藍(lán)紫色甲臌沉淀。甲臌形成的量與活細(xì)菌數(shù)在一定范圍內(nèi)成線性關(guān)系,用二甲基亞砜溶解沉淀,并用酶標(biāo)儀測定甲脫相對含量,以此推算PMN殺菌百分率。與平板計數(shù)法比較,用MTr法測定PMN
3、的殺菌功能具有快速、簡便、變異系數(shù)小以及一次可鍘多個樣品等優(yōu)點(diǎn),檢測結(jié)果與平板計數(shù)法相一致。利用MTT法測定奶牛血液和乳中PMN的殺菌功能,結(jié)果顯示,乳中PMN殺菌能力遠(yuǎn)低于血液中PMN。這可能是奶牛乳腺易受感染的一個原因。2常用補(bǔ)益中藥和復(fù)方對奶牛PMN吞噬殺菌功能的影響在實驗室制備女貞子、淫羊藿、黃芪多糖、絞股藍(lán)總皂甙、當(dāng)歸補(bǔ)血湯、四君子湯、補(bǔ)中益氣湯、四物湯、六味地黃湯、腎氣丸、玉屏風(fēng)散等滅菌水溶液。將奶牛外周血PMN、金黃色葡萄
4、球菌以及不同濃度的中藥藥液于370C振蕩培養(yǎng)60分鐘。用mT法測定PMN的殺菌百分率。結(jié)果表明,j二述中藥藥液大多數(shù)在一定濃度下顯示促進(jìn)血中PMN吞噬殺菌能力。其中黃芪多糖、六味地黃湯在藥物濃度為0Olmg/ml時促進(jìn)作用最強(qiáng),與對照比較,差異極顯著(pO01),低于或大于此濃度,促細(xì)胞殺菌能力減弱;玉屏風(fēng)散、補(bǔ)中益氣湯、四物湯和腎氣丸、四君子湯等藥物組分別在0Olmg/mllO1mg/ml時,PMN吞噬殺菌作用最強(qiáng),與對照比較,差異顯
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