雞lats同源基因的篩選和功能鑒定.pdf_第1頁(yè)
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1、首先,我們利用人LATS1 cDNA序列作為探針,以低嚴(yán)謹(jǐn)度雜交方法,從雞的胚胎cDNA文庫(kù)中克隆了lats同源基因,雞LATS1基因.篩庫(kù)所得的兩個(gè)重疊假選克隆拼接后得以了雞LATS1基因的cDNA,它含有一個(gè)完整的開放閱讀框,編碼一個(gè)具有1136個(gè)氨基酸的蛋白.序列同源性比較表明雞LATS1基因與人LATS1基因、小鼠LATS1基因及牛LATS1基因都具有很高的同源性.像其它LATS同源蛋白一樣,雞LATS1蛋白的C端具有一個(gè)保守的

2、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶域.在果蠅體中,利用UAS/GAL4表達(dá)系統(tǒng)過(guò)量表達(dá)雞LATS1基因可引起果蠅的器官和個(gè)體變小.而且,雞LATS1基因還可以部分拯救lats突變品系lats<'e26-1>純合突變果蠅的成蛹期致死,個(gè)體增大等表型缺陷.Northern雜交實(shí)驗(yàn)表明,雞LATS1基因在所有的檢測(cè)組織中都有表達(dá),而且在卵巢中表達(dá)最高,這與人LATS1基因的Nothern雜交實(shí)驗(yàn)相似.這些數(shù)據(jù)表明,雞LATS1基因是真正的果蠅lats腫瘤

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