暈船適應(yīng)大鼠差異表達(dá)基因的篩選和鑒定.pdf

1、研究目的:篩選暈船適應(yīng)前后大鼠腦干、下丘腦差異表達(dá)基因,以探討暈船適應(yīng)機(jī)理,為有效提高暈船適應(yīng)能力提供新途徑.研究方法和內(nèi)容:1、暈船適應(yīng)大鼠動(dòng)物模型的建立:將經(jīng)進(jìn)篩選的40只SD雄性大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、暈船組(第3天模擬暈船刺激后立即處死)、暈船適應(yīng)組(第21天模擬暈船刺激后立即處死)和適應(yīng)對(duì)照組(第21天模擬暈船刺激后24h處死),除正常對(duì)照組外其它各組均接受模擬暈船刺激.主要通過大鼠接受模擬暈船刺激后異食高嶺土量的增減并結(jié)合行

2、為變化及模擬暈船刺激過程中各組大鼠血漿ACTH、β-EP及腎上腺VitC含量變化的情況來綜合判斷大鼠對(duì)模擬暈船刺激有無暈船癥狀及適應(yīng)的產(chǎn)生.2、暈船適應(yīng)大鼠腦干、下丘腦差異表達(dá)基因的篩選和鑒定;采用抑制消減雜交方法將經(jīng)過模擬暈船刺激獲得暈船適應(yīng)大鼠的腦干、下丘腦組織分別與正常大鼠相應(yīng)組織進(jìn)行正、反向雜交,構(gòu)建暈船適應(yīng)大鼠腦干、下丘腦差減cDNA文庫,應(yīng)用dot blot進(jìn)行陽性克隆的鑒定.3、血紅素加氧酶-3在暈船適應(yīng)前、后大鼠組織中的

3、表達(dá)變化;用半定量RT-PCR對(duì)大鼠暈船適應(yīng)前后腦干、下丘腦、腎上腺等組織中血紅素加氧酶-3基因表達(dá)變化進(jìn)行分析.結(jié)論:1、大鼠暈船適應(yīng)動(dòng)物模型的建立是成功的.2、構(gòu)建了暈船適應(yīng)大鼠腦干、下丘腦差減cDNA文庫.獲得29條已知功能基因片段,其中上調(diào)17條,下調(diào)12條;19條未知功能基因片段,上調(diào)7條,下調(diào)12條.3、泛素系統(tǒng)、SAM、腺甘酸環(huán)化酶系統(tǒng)、線粒體基因組、包括加壓素、催產(chǎn)素、胰島素在內(nèi)的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)、血紅素加氧酶等系統(tǒng)在暈船